フィロウイルスの病原性発現とその分子基盤に関する研究

丝状病毒致病性及其分子基础研究

• 批准号: 14021018
• 负责人: 高田 礼人
• 金额: $ 4.48万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14021018/
• 关键词: フィロウイルス; 病原性; 表面糖蛋白質; 抗体依存性感染増強; エピトープ

エボラウイルスの強い病原性に関わる因子は解明されていない。本ウイルスに対して効果的な予防・治療法を開発するためには、病原性発現のメカニズムを個体、細胞および分子レベルに至るまで明らかにする事が必要である。エボラウイルスの表面糖蛋白質(GP)に対して誘導される抗体の中には、ウイルスの感染を増強するものが存在する事をこれまでに明らかにした。感染患者回復期血清を調べると、約半数に感染増強活性が認められたので、実際の感染でも感染増強抗体の産生が誘導されている事が明らかになった。GPに対するモノクローナル抗体(MAb)のうち、ウイルスを中和する活性を示すものに関して、エピトープの同定を行った。VSVのG蛋白質遺伝子をZaire株GP遺伝子に置換したリコンビナントVSVを中和抗体存在下で増殖させてエスケープミュータントを選択し、GPのアミノ酸変異を同定したところ、MAb133/3.16は膜融合ペブチド、MAb226/8.1はレセプター結合領域付近のエピトープを認識すると考えられた。これらの抗体の受動免疫による感染防御効果をマウスモデルを用いて調べた。抗体をウイルス攻撃前あるいは後に腹腔内に投与したマウスは致死量のウイルス感染に対して無症状で耐化した。ウイルス感染後に抗体価の上昇が全く認められなかった事から、ウイルスはマウス体内で殆ど増殖しなかったと考えられる。これらの結果は、中和抗体のみを用いての受動免疫法がエボラウイルス感染に対して有効である事を示唆する。(注)実際のエボラウイルスを用いた実験は、Feldmann博士の協力でカナダの国立研究施設Canadian Science Centre for Human and Animal Healthで行った。

尚未阐明埃博拉病毒强烈致病性的因素。为了开发该病毒的有效预防和治疗方法，有必要阐明致病性表达的机制，直到个体，细胞和分子水平。以前已经揭示了一些针对埃博拉病毒表面糖蛋白（GP）诱导的一些抗体可增强病毒感染。在检查感染患者的康复期间血清时，大约一半的感染者具有增强感染的活性，发现即使在实际感染中也诱导了感染增强抗体的产生。针对具有病毒中和活​​性的GP的单克隆抗体（mAb）鉴定了表位。重组VSV，其中VSV的G蛋白基因被Zaire菌株GP基因取代，在存在中和抗体的存在下生长以选择逃生突变体，并鉴定出GP的氨基酸突变。人们认为MAB133/3.16是一种膜融合膜，MAB226/8.1是受体结合区域附近的表位。使用小鼠模型研究了这些抗体对这些抗体的感染保护作用。在病毒挑战之前或之后已腹膜内治疗的小鼠无症状地耐受性剂量的病毒感染剂量。由于病毒感染后未观察到抗体滴度的增加，因此人们认为该病毒在小鼠体内很少增殖。这些结果表明，仅使用中和抗体的被动免疫有效，可以防止埃博拉病毒感染。 （注意）使用埃博拉病毒的实际实验是在加拿大加拿大人类和动物健康科学中心（加拿大国家研究机构）与费尔德曼博士合作进行的。

项目成果

Ninomiya, A., Ogasawara, K., Kajino, K., Takada, A., Kida, H.: "Intranasal administration of a synthetic peptide vaccine encapsulated in liposome together with an anti-CD40 antibody induces protective immunity against influenza A virus in mice"Vaccine. 20

Ninomiya, A.、Ogasawara, K.、Kajino, K.、Takada, A.、Kida, H.：“鼻内施用封装在脂质体中的合成肽疫苗与抗 CD40 抗体可诱导针对甲型流感病毒的保护性免疫

Takada, A., Feldmann, H., Stroeher, U., Bray, M., Watanabe, S., Ito, H., McGregor, M., Kawaoka, Y.: "Identification of protective epitopes on Ebola virus glycoprotein at the single amino acid level using recombinant vesicular stomatitis viruses"Journal of

Takada, A.、Feldmann, H.、Stroeher, U.、Bray, M.、Watanabe, S.、Ito, H.、McGregor, M.、Kawaoka, Y.：“埃博拉病毒糖蛋白上保护性表位的鉴定

Noda, T., Sagara, H., Suzuki, E., Takada, A., Kida, H., Kawaoka, Y.: "Ebola virus VP40 drives the formation of virus-like filamentous particles with GP"Journal of Virology. 76. 4855-4865 (2002)

Noda, T.、Sagara, H.、Suzuki, E.、Takada, A.、Kida, H.、Kawaoka, Y.：“埃博拉病毒 VP40 通过 GP 驱动病毒样丝状颗粒的形成”《病毒学杂志》。

堀本泰介, 五藤秀男, 高田礼人, 河岡義裕: "ウイルスの病原性発現における糖タンパク質の役割"Molecular Medicine. 39. 212-226 (2002)

Taisuke Horimoto、Hideo Goto、Reito Takada、Yoshihiro Kawaoka：“糖蛋白在病毒致病性表达中的作用”分子医学。 39. 212-226 (2002)

Park, C.H., Ishinaka, M., Takada, A., Kida, H., Kimura, T., Ochiai, K., Umemura, T.: "The invasion routes of neurovirulent A/Hong Kong/483/97 (H5N1) influenza virus into the central nervous system after respiratory infection in mice"Archives of Virology.

Park, C.H.、Ishinaka, M.、Takada, A.、Kida, H.、Kimura, T.、Ochiai, K.、Umemura, T.：“神经毒力 A/香港/483/97 (H5N1) 的入侵途径