ポリオウイルス感染におけるM細胞の役割の検討

M 细胞在脊髓灰质炎病毒感染中的作用研究

• 批准号: 14021033
• 负责人: 大野 博司
• 金额: $ 3.84万
• 依托单位: Kanazawa University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14021033/
• 关键词: ポリオウイルス; ポリオウイルス受容体; 感染様式; 腸管上皮細胞; M細胞; 極性輸送

ポリオウイルスの初期感染には腸管上皮のポリオウイルス受容体(PVR)を必要とするが、その細胞内局在やポリオウイルスの感染様式は不明である。PVRにはαとδのスプライスアイソフォームが存在する。上皮細胞株MDCKに2つのPVRアイソフォームを発現させてその局在を調べた結果、PVRαは側底面細胞膜に、PVRδは頂端面および側底面細胞膜の両方に局在することが明かとなった。膜蛋白質の側底面への局在は、一般にその細胞質領域に存在する輸送シグナルによって決められる。最も頻繁に見られる側底面への輸送シグナルはYXXΟ(Yはチロシン、Xは任意のアミノ酸、Οは疎水性アミノ酸)という共通配列を持つチロシンモチーフであり、上皮細胞特異的に発現する輸送因子AP-1B複合体のμ1Bサブユニットに認識されることによって側底面への輸送を担うことが知られている。PVRαの細胞質領域にはYSAVという配列が存在する。PVRαの細胞質領域の欠損変異体およびYSAVの点突然変異体を用いた酵母2-hybrid法および上皮細胞株MDCK、LLC-PK1への遺伝子導入により、YSAV配列はμ1Bと直接結合してPVRαの側底面への輸送を担う、チロシンモチーフとして機能することが示された。現在、リンパ球と共培養することにより、抗原取込みに重要な役割を果たす特殊に分化した腸管上皮、M細胞様に分化するマウス腸管上皮細胞株m-ICc12のPVRαあるいはPVRδ安定発現株を樹立中であり、これらを用いてポリオウイルス初期感染における、M細胞を含めた腸管上皮細胞の役割を検討する。

The initial infection of the virus is due to the presence of PVR in the intestinal epithelium, and the infection mode of PVR in the intracellular structure is unknown. PVR is a very important tool for improving the quality of products. Epithelial cell lines MDCK 2 and PVR 3 were found in the middle of the cell membrane, PVRα in the bottom of the cell membrane, PVRδ in the top of the cell membrane and PVRδ in the bottom of the cell membrane. Membrane proteins are present in the cytoplasmic domain in general and in the transport system. The most frequently observed transport profile of the AP-1B complex is YXX (Y, X, arbitrary acid, 0, aqueous acid), common alignment, epithelial cell-specific development, and transport profile of the AP-1B complex. PVRα is a cytoplasmic domain, and YSAV is a binary domain. The yeast 2-hybrid method was used to introduce the mutant gene into epithelial cell lines MDCK and LLC-PK1, and YSAV was aligned with μ1B to directly bind to PVRα. Now, in the co-culture, the antigen selection is important for the differentiation of intestinal epithelium, M cell differentiation is important for the establishment of intestinal epithelial cell line m-ICc12 and PVRα, PVRδ stable strain is important for the establishment of intestinal epithelial cell differentiation, M cell selection is important for the establishment of intestinal epithelial cell differentiation.

项目成果

Eskelinen, E.-L., Meyer, C., Ohno, H., von Figura, K., Schu, P.: "The polarized epithelia specific μ1B-adaptin complements μ1A-deficiency in fibroblasts"EMBO Report. 3(5). 471-477 (2002)

Eskelinen, E.-L.、Meyer, C.、Ohno, H.、von Figura, K.、Schu, P.：“极化上皮特异性 μ1B-适应素可补充成纤维细胞中的 μ1A 缺陷”EMBO 报告 3(5)。 ）471-477（2002）。

Nishimura, K., Nakatsu, F., Kashiwagi, K., Ohno, H., Saito, T., Igarashi, K.: "Essential role of S-adenosylmethionine decarboxylase in mouse embryonic development"Genes Cells. 7(1). 41-47 (2002)

Nishimura, K.、Nakatsu, F.、Kashiwagi, K.、Ohno, H.、Saito, T.、Igarashi, K.：“S-腺苷甲硫氨酸脱羧酶在小鼠胚胎发育中的重要作用”基因细胞。

Sugimoto, H., Sugahara, M., Folsch, H., Koide, Y., Nakatsu, F., Tanaka, N., Nishimura, T., Furukawa, M., Mullins, C., Nakamura, N., Mellman, I., Ohno, H.: "Differential recognition of tyrosine-based basolateral signals by the AP-1B subunit μ1B in polarize

杉本 H.、菅原 M.、福尔施 H.、小出 Y.、中津 F.、田中 N.、西村 T.、古川 M.、穆林斯 C.、中村 N.、 Mellman, I., Ohno, H.：“极化中 AP-1B 亚基 μ1B 对基于酪氨酸的基底外侧信号的差异识别

Nakamichi, N., Ohno, H., Kuramoto, N., Yoneda, Y.: "Dual mechanisms of Ca^<2+> increases elicited by N-methyl-D-aspartate in immature and mature cultured cortical neurons"J.Neurosci.Res.. 67(2). 275-283 (2002)

Nakamichi, N.、Ohno, H.、Kuramoto, N.、Yoneda, Y.：“在未成熟和成熟的培养皮质神经元中，N-甲基-D-天冬氨酸引起 Ca^2 > 增加的双重机制”J.Neurosci

Fukamachi, K., Matsuoka, Y., Ohno, H., Hamaguchi, T., Tsuda, H.: "Neuronal leucine-rich repeat protein-3 amplifies MAP kinase activation by EGF through a carboxyl-terminal region containing endocytosis motifs"J.Biol.Chem.. 277(46). 43549-43552 (2002)

Fukamachi, K.、Matsuoka, Y.、Ohno, H.、Hamaguchi, T.、Tsuda, H.：“神经元富含亮氨酸的重复蛋白 3 通过含有胞吞基序的羧基末端区域放大 EGF 的 MAP 激酶激活”