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持続性に優れたワクチン開発のための記憶B細胞長期生存に関わる因子の同定

鉴定参与记忆 B 细胞长期存活的因素，用于开发长效疫苗

基本信息

批准号：
14021135
负责人：
竹森利忠
金额：
$ 2.3万
依托单位：
National Institute of Infectious Diseases
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

持続性に優れたワクチン開発のための記憶B細胞長期生存に関わる因子の同定のために、記憶B細胞で高発現する膜蛋白・分泌蛋白をコードする遺伝子のスクリーニングを行った。すなわち、記憶B細胞から大量にcoding RNAを合成し、大規模なレトロウィルスcDNAライブラリーを作成した。これを用いて、シグナルシークエンストラップ法によるスクリーニングを行った結果、約2000の膜蛋白・分泌蛋白をコードするcDNAクローンの単離に成功した。得られたクローンを用いてcDNAマイクロアレイを作成し、記憶B細胞と未感作B細胞での発現量を比較したところ、3倍以上の変化が見られたクローンを59個検出した。これとは別にマウスの約8600の遺伝子を含むcDNAマイクロアレイに対して、記憶B細胞及び未感作B細胞より精製したRNAを増幅してプローブとしてハイブリダイゼーションを行うたところ、マイクロアレイ上記憶B細胞で2倍以上発現の変化する遺伝子として440個の遺伝子を同定した。この中には判明しているだけで78の膜蛋白・分泌蛋白が含まれており、そのうち特に、RT-PCR法によって記憶B細胞で高発現を確認した既知のケモカインレセプターをコードするclone Ag2、同じく既知のサイトカインをコードするclone Ag190など、6つの遺伝子について注目し、記憶B細胞における蛋白としての発現や機能について現在解析を行っている。

The expression of membrane proteins and secreted proteins in memory B cells is related to the long-term survival of memory B cells. A large number of coding RNA were synthesized in memory B cells, and a large number of coding RNA were synthesized in memory B cells. The results of this study show that about 2000 membrane proteins and secreted proteins have been successfully isolated from cDNA. The number of memory B cells and unsensed B cells detected was more than 3 times that of unsensed B cells. About 8600 genes were found in memory B cells and undetected B cells, and 440 genes were found in memory B cells. 78 membrane proteins and secreted proteins were identified, and high levels of memory B cells were identified by RT-PCR. 78 clone Ag2, 78 clone Ag190, and 68 secreted proteins were identified. Memory B cell protein development and function analysis