がん悪性化に関与する異数体生成の分子メカニズムの解明

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染色体分配に必須なセントロメアのクロマチン構築の分子基盤を、セントロメア特異的ヒストンCENP-Aの局在化機構の解明を通し探求し、がん悪性化に関与する異数体生成の分子機構の解明を進めた。具体的には以下の各点についてデータの蓄積もしくは新規の発見があった。1)CENP-Aやその局在化因子Mis6の分裂酵母変異株の解析から、セントロメアのクロマチン構造がCENP-Aの融通性のあるローディング機構に依存した可塑的構造を持つこと示唆するデータを得た。分裂酵母CENP-Aの温度感受性蛋白質の挙動をGFP融合で追跡した実験から、細胞周期に依存しないCENP-A蛋白質の局在化が起こる可能性が示唆された。2)mis6温度感受性変異の多コピーサプレッサースクリーニングを行い、新規セントロメア蛋白質Mix1を分離し、遺伝子破壊実験から染色体分配に必須機能を持つこと、Mis6コアセントロメア蛋白質と極めて類似の表現型を示すことを明らかにした。またMix1のポテンシャルなヒトホモログを同定した。3)CENP-A温度感受性変異株の多コピーサプレッサー遺伝子スクリーニングから、Ams2と名付けた細胞周期に依存して発現するGATA因子を分離した。Ams2がセントロメアのGATAをコアとするDNA配列に直接結合しCENP-Aと共局在すること、CENP-Aの局在効率を制御し高い染色体分配頻度を保障している可能性を示唆するデータを得た。またAms2はMis6とは異なるCENP-A局在化パスウェイに属することを、免疫沈降法や遺伝的掛け合わせにより示した。それらのデータをチューンアップし論文にまとめて公表した。