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セントロメア機能制御系の構築を軸にしたゲノム伝達操作技術の開発

以着丝粒功能控制系统构建为核心的基因组转移操作技术的发展

基本信息

批准号：
13206038
负责人：
高橋考太
金额：
$ 3.07万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13206038/
关键词：
セントロメアヌクレオソーム染色体分配分裂酵母 CENP-A GATA

项目摘要

特にCENP-AホモログCnp1のローディング機構の制御ネットワークの網羅的解明にむけ、変異株およびサプレッサー遺伝子群の分離と分裂酵母ヒストン遺伝子の遺伝学構築を計画した。cnp1およびmis6変異株と同様の表現型を示す温度感受性変異株の系統的スクリーニングを行い、新たに5種の遺伝子座を同定した。ヒストン遺伝子については多重破壊に着手、これまでにヒストンH3とH4がゲノム上1コピーしか存在しない変異株の作成に成功した。また、cnp1温度感受性変異株の多コピーサプレッサー遺伝子として4種のAms遺伝子を分離した。Ams1、Ams3、Ams4がゲノム上遺伝子が3コピー重複するヒストンH4であること、Ams2が新規GATA転写因子型zinc fingerタンパク質であることを明らかにした。Ams2はcnp1変異だけではなくMis12セントロメアタンパク質の遺伝子変異およびそれに関連する遺伝子変異をも多コピーで相補することができた。ams2破壊株ではCnp1のセントロメア局在が顕著に低下、M期における常染色体の高頻度脱落により、極めて深刻な生育遅延が起こることがわかった。ヒストンH4もしくはCnp1の増量でこの生育遅延が大部分相補されることから、Ams2はセントロメアクロマチン形成にヌクレオソームレベルで関与する制御因子である可能性が示唆される。面白いことに、野生株細胞中においてもAms2をectopicに増量するだけで、局在能を失ったcnp1-1変異タンパク質をセントロメアへ再ローディングすることができた。Ams2は染色体が倍加するG1/SからG2初期にかけて増量しクロマチン領域に局在する。以上の結果は、Ams2が細胞周期を通じて維持されるCENP-Aのローディング活性を保障する重要な制御因子である可能性を示唆している。

In particular, CENP-A is a project for the genetic construction of Cnp1, Cnp 2, Cnp1, Cnp 1, Cnp 1 The phenotype of cnp1 and mis6 different plants shows that the system of temperature sensitive different plants has the same phenotype, and the new 5 different plants have the same phenotype. The first step is to start with multiple breakthroughs, and the second step is to start with H3 and H4. The temperature sensitive plants were isolated from four kinds of Ams. Ams1, Ams3, Ams4, Ams2, Ams3, Ams4, Ams3, Ams4, Ams4, Ams3, Ams4, Ams3, Ams4, Ams4, Ams3, Ams4, Ams4, Ams3, Ams4, Ams3, Ams4, Ams Ams2-cnp-1 is different, Mis-12 is different. AMS2 is the highest frequency of autosome shedding in the M phase, and the highest frequency of autosome shedding in the M phase. Since the increase in Cnp1 and the delay in fertility are mostly compensated for by Ams2, it is possible that Ams2 is a controlling factor in the formation of the local market. In white and wild cells, the amount of Ams2 increased, and the amount of cnp1-1 decreased. Ams2 chromosome duplication G1/S early stage increase in the number of sites These results suggest the possibility that Ams2 plays an important role in cell cycle maintenance and maintenance of CENP-A activity.