セントロメア機能制御系の構築を軸にしたゲノム伝達操作技術の開発

以着丝粒功能控制系统构建为核心的基因组转移操作技术的发展

• 批准号: 14014223
• 负责人: 高橋 考太
• 金额: $ 4.54万
• 依托单位: Kurume University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14014223/
• 关键词: 染色体; セントロメア; CENP-A; 分裂酵母; ヌクレオソーム

当初の予定通り、分裂酵母の新規GATA因子Ams2とセントロメア機能との関連を示唆するデータをチューンアップし、論文にして公表することができた。またコアセントロメア蛋白質Mis6の遺伝的相互作用因子の同定について大きな進展があった。具体的には以下の各点についてデータの蓄積もしくは新規の発見があった。1)免疫沈降法や遺伝的掛け合わせでAms2とMis6の遺伝的物理的関連を調べた。その結果、セントロメア特異的ヒストンH3バリアントCENP-Aの局在には少なくとも2つの異なったパスウェイが必要であることを示唆するデータを得た。現在、CENP-Aの局在化には、Ams2によるセントロメアヌクレオソームのリモデリングとMis6によるCENP-Aの捕捉もしくは安定化が必要とのモデルに基づき検証作業を進めている。2)クロマチン免疫沈降法によりAms2はCENP-Aの局在化しているセントロメア中央コア領域に結合していることを示した。さらにこの領域内のGATAをコアにする配列に特異的に結合していることをゲルシフト法で明らかにした。これはGATA因子がセントロメアに結合し機能している可能性を示唆する初めての報告である。3)Ams2が細胞周期に依存してタンパク量およびその修飾状況を制御されているGATA因子であることを示唆するデータを得た。これは細胞周期依存的制御を受けるGATA因子の初めての報告である。4)Mis6温度感受性変異の多コピーサプレッサー遺伝子の網羅的スクリーニングを開始し、新規セントロメア遺伝子Mix1を分離した。

The new GATA factor Ams2 of the original yeast was determined to be related to the function of the yeast. There has been great progress in the identification of the interaction factors of the Mis6 gene of the a a protein. The specific points are as follows: 1)The immune sedimentation method and the genetic association between Ams2 and Mis6 are the physical relations of the genetic association. As a result, CENP-A has a small number of different functions and needs to be shown. CENP-A is now in the process of being stabilized, Ams2 is in the process of being stabilized, and the detection of CENP-A is necessary. 2) CENP-A immuno-sedimentation method 2) CENP-A immuno-sedimentation method The GATA in this field is arranged in a specific way. This is the first time that the GATA factor has been reported. 3) Ams2 cell cycle dependence and modification of the GATA factor The cell cycle dependent regulation of GATA factors is reported. 4)Mis6 temperature sensitivity variation and multi-channel temperature sensitivity variation and multi-channel temperature sensitivity variation and multi-channel temperature sensitivity variation

项目成果

Yusuke Toyoda: "Requirement of chromatid cohesion proteins rad21/scc1 and mis4/scc2 for normal spindle-kinetochore interaction in fission yeast"Current Biology. 12(5). 347-358 (2003)

Yusuke Toyoda：“裂殖酵母正常纺锤体-着丝粒相互作用所需的染色单体凝聚蛋白 rad21/scc1 和 Mis4/scc2”《当代生物学》。

Ee Sin Chen: "A cell cycle-regulated GATA factor promotes centromeric localization of CENP-A in fission yeast"Molecular Cell. 11(1). 175-187 (2003)

Ee Sin Chen：“细胞周期调节的 GATA 因子促进裂殖酵母中 CENP-A 的着丝粒定位”《分子细胞》。