膜ミクロドメインのスフィンゴ糖脂質による細胞増殖・分化・死のシグナル制御

膜微区中鞘糖脂对细胞增殖、分化和死亡信号的调节

• 批准号: 14028029
• 负责人: 古川 鋼一
• 金额: $ 4.03万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14028029/
• 关键词: ラフト; GEM; シグナル; リモデリング; 糖転移酵素; リン酸化; 増殖; ノックアウト

ラフト/GEMでのスフィンゴ糖脂質によるシグナル制御機構を糖鎖リモデリングにより解析した。マウス線維芽細胞株Swiss3T3において、GM1高発現クローンでは細胞増殖やPDGF受容体およびMAPKのリン酸化反応が低下し、GD3合成酵素cDNA導入では、明らかな増殖の亢進が認められた。MAPKリン酸化は、無血清処置後のFCS刺激では、GD3発現細胞がより強いMAPKリン酸化反応を示した。また、PDGF刺激によっても同様の傾向を認めたため、GD3高発現株におけるPDGFRの局在、GD3とPDGFRとの会合につき検討中である。一方、PC12細胞にGM1合成酵素cDNAを発現させると、NGF刺激に応答せず、TrkAのリン酸化、2量体形成、MAPKリン酸化なども見られなくなった。その機序として、TrkA、P75NTR、Rasが、非ラフト/GEM分画に移動していることが判明した。GM1の高発現がTrkAやRasのラフト/GEM局在を大きく変えることが示された。更に、ツニカマイシン処理後のPC12からTrkAを免疫沈降してGM1の結合を見たところ、matureな140kDaのTrkAには結合が見られたが、immatureな110kDaのTrkAには結合が見られなかった。さらに、複合型ガングリオシド合成酵素遺伝子KOマウスの脊髄後根神経節よりニューロンの初代培養系を確立し、その細胞数、生存日数、NGFに対する応答などを観察したが、現在のところ明瞭な変異は認められない。

The analysis of sugar and lipid control mechanism in GEM The expression level of GM1 in the cell line Swiss 3T3 was higher than that in the control group. The expression level of PDGF receptor and MAPK was lower than that in the control group. The expression level of GD3 synthase cDNA was higher than that in the control group. MAPK activation was detected by FCS stimulation after serum-free treatment, and GD3 cells showed strong MAPK activation. PDGF stimulation is the same as PDGFR. PDGFR is highly expressed in GD3. PDGFR is present in GD3. PDGFR is present in GD3. GM1 synthase cDNA expression in PC12 cells, NGF stimulation, TrkA phosphorylation, 2-mer formation, MAPK phosphorylation, etc. The sequence of events, TrkA, P75NTR, Ras, and GEM are identified. GM1 's high level of development is TrkA, Ras, and GEM. After treatment, PC12 and TrkA are bound to GM1, mature TrkA is bound to GM1, immature TrkA is bound to GM1, and mature TrkA is bound to GM1. In addition, the establishment of a primary culture system for the complex type of enzyme synthase gene KO, the number of cells, the number of survival days, and the response to NGF were observed.

项目成果

Nakamura, Y. et al.: "Identification of a Drosophila gene encoding xylosylprotein β 4-galactosyltransferase that is essential for the synthesis of glycosaminoglycans and for morphogenesis"J.Biol.Chem.. 277. 46280-46288 (2002)

Nakamura, Y. 等人：“编码木糖基蛋白 β 4-半乳糖基转移酶的果蝇基因的鉴定，该酶对于糖胺聚糖的合成和形态发生至关重要”J.Biol.Chem.. 277. 46280-46288 (2002)

Mitsuda, T. et al.: "Over-expression of ganglioside GM1 results in the dispersion of platelet derived growth factor receptor from glycolipid-enriched microdomains and in the suppression of cell growth signals"J.Biol.Chem.. 277. 11239-11246 (2002)

Mitsuda, T. 等人：“神经节苷脂 GM1 的过度表达导致血小板衍生的生长因子受体从富含糖脂的微结构域中分散，并抑制细胞生长信号”J.Biol.Chem.. 277. 11239-

Furukawa, K. et al.: "Expression of the Gb3/CD77 synthase gene in megakaryoblastic leukemia cells : implication in the sensitivity to verotoxins"J. Biol. Chem.. 277. 11247-11254 (2002)

Furukawa, K. 等人：“巨核细胞白血病细胞中 Gb3/CD77 合酶基因的表达：对维罗毒素敏感性的影响”J.

Chen, H.H.et al.: "Suppression of lung metastasis of mouse Lewis lung cancer P29 with transfection of the ganglioside GM2/GD2 synthase gene"Int.J.Cancer. 103. 169-176 (2002)

Chen, H.H. 等人：“通过转染神经节苷脂 GM2/GD2 合酶基因抑制小鼠 Lewis 肺癌 P29 的肺转移”Int.J.Cancer。

Okada, M. et al.: "b-series ganglioside deficiency exhibits no definite changes in the neurogenesis and the sensitivity to Fas-mediated apotosis, but impairs regeneration of the lesioned hypoglossal nerve"J. Biol. Chem.. 277. 1633-1636 (2002)

Okada, M. 等人：“b 系列神经节苷脂缺乏症在神经发生和对 Fas 介导的细胞凋亡的敏感性方面没有表现出明确的变化，但会损害受损舌下神经的再生”J.