CD3合成酵素遺伝子により誘導される細胞増殖シグナルの機構解析

CD3合酶基因诱导细胞增殖信号的机制分析

• 批准号: 10152223
• 负责人: 古川 鋼一
• 金额: $ 2.24万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10152223/
• 关键词: ガングリオシド; 糖脂質; 糖転移酵素; メラノーマ; GD3; PC12

ヒトのメラノーマやT細胞白血病に特異的に発現するGD3の細胞増殖における意義につき、GD3合成酵素遺伝子を種々の細胞に導入して、その表現型の変化を検討することにより解析した。まずラット褐色細胞腫PC12に、GD3合成酵素遺伝子を導入したトランスフェクタントでは、1.著しい増殖速度の亢進、2.神経成長因子(NGF)による分化誘導に対する不応、3.無血清処置によるアポトーシスへの抵抗性の獲得などが主な変化として観察された。著しい増殖能をもたらしたメカニズムの検討のため、NGF受容体TrkAのリン酸化、その下流のMAPキナーゼの活性化状態につき検討したところ、GD3合成酵素遺伝子導入細胞では、NGF刺激の有無に関わらず、TrkAのリン酸とMAPキナーゼの活性化を認めた。種々のキナーゼインヒビターを用いた増殖抑制実験の結果から、このトランスフェクタントで見られる増殖の亢進がTrkA/Ras/MAPキナーゼ系を介していることが示唆された。また、TrkAの二量体形成もNGF刺激に無関係に見られた。よって遺伝子導入によりTrkAの構造的変異が惹起され、恒常的な活性化状態を招いたと思われる。また、無血清培地によるアポトーシス誘導に対して、このトランスフェクタントは抵抗性を示したが、PI3キナーゼインヒビターのワルトマニン存在下ではアポトーシス抵抗性が消失した。よって、このトランスフェクタントでは糖鎖変化によってPI3キナーゼ活性が上昇していることが示唆された。これらの結果は、メラノーマやT細胞白血病の腫瘍増殖の機構の一部を反映するものと思われ、現在メラノサイトに対する遺伝子導入、糖脂質改変を行って、その細胞変化の検討を行っている。

ヒ ト の メ ラ ノ ー マ や に specific T cell leukemia に 発 now す る GD3 の cells raised colonization に お け る meaning に つ き GD3 synthesis and enzyme heritage 伝 を kind son 々 の cells に import し て, そ の phenotype の variations change を beg す 検 る こ と に よ り parsing し た. Youdaoplaceholder0 brown cell tumor PC12に, GD3 synthetic enzyme progeny 伝 を introduction of <s:1> たトラ スフェ スフェ タ タ トで トで トで トで トで トで トで トで トで トで, 1. 1. The growth rate is hyperactive, 2. The neuro-economic growth factor (NGF)による differentiation-induced に is not 応, 3. Serum-free treatment によるアポト シスへ シスへ <s:1> resistance <e:1> results in な <s:1> が が main な changes と て観 て観 observation された. The し い rights can yield を も た ら し た メ カ ニ ズ ム の beg の 検 た め, NGF plays the body TrkA の リ ン acidification, そ の obscene の MAP キ ナ ー ゼ の activation state に つ き beg し 検 た と こ ろ GD3 synthesis and enzyme heritage 伝 import cells で は, model NGF stimulation の presence of に masato わ ら ず, TrkA の リ ン acid と MAP キ ナ ー ゼ の activeness Youdaoplaceholder0 recognize めた. Kind of 々 の キ ナ ー ゼ イ ン ヒ ビ タ ー を with い た raised colonization inhibit be 験 の results か ら, こ の ト ラ ン ス フ ェ ク タ ン ト で see ら れ る raised colonization の hyperthyroidism が TrkA/Ras/MAP キ ナ ー ゼ department を interface し て い る こ と が in stopping さ れ た. Youdaoplaceholder0, TrkA <s:1> diplome formation また NGF stimulation に is not related に see られた. よ っ て posthumous son 伝 import に よ り TrkA の variations of different structures が provoked さ れ, constant state of な activeness を recruit い た と think わ れ る. ま た, serum-free culture に よ る ア ポ ト ー シ ス induced に し seaborne て, こ の ト ラ ン ス フ ェ ク タ ン ト は resistance を shown し た が, PI3 キ ナ ー ゼ イ ン ヒ ビ タ ー の ワ ル ト マ ニ ン presence で は ア ポ ト ー シ ス resistance が disappear し た. よ っ て, こ の ト ラ ン ス フ ェ ク タ ン ト で は sugar - turn lock に よ っ て PI3 キ ナ ー ゼ active が rise し て い る こ と が in stopping さ れ た. こ れ ら の results は, メ ラ ノ ー マ や T cell leukemia の swollen sores の institutions の a rights issue colonization を reflect す る も の と think わ れ, now メ ラ ノ サ イ ト に す seaborne る heritage 伝 import, sugar, lipid change - line を っ て, そ の cells - the の 検 line for を っ て い る.

项目成果

Iwanaga Masako: "Paroxysmal nocturnal haemoglobinuria clones in patients with myelodysplastic syndromes." Br.J.Haematol.102. 465-474 (1998)

Iwanaga Masako：“骨髓增生异常综合征患者的阵发性睡眠性血红蛋白尿克隆。”

Borgeld Harm-Jan Warner: "Appropriately spaced nuclear localizing signals are necessary for efficient nuclear import of non-nuclear proteins." Biochem.Biophys.Res.Commun.(in press).

Borgeld Harm-Jan Warner：“适当间隔的核定位信号对于非核蛋白的有效核输入是必要的。”

Fukumoto Satoshi: "Expression cloning of mouse cDNA of CMP-NeuAc : lactosylceramide α2,3-sialyltransferase (GM3 synthase), an enzyme that initiates the synthesis of gangliosides." J.Biol.Chem.in press.

Satoshi Fukumoto：“CMP-NeuAc 的小鼠 cDNA 的表达克隆：乳糖神经酰胺 α2,3-唾液酸转移酶（GM3 合酶），一种启动神经节苷脂合成的酶，见 J.Biol.Chem.in press。”

Fukuda Minoru: "Enhancement of in vitro and in vivo anti-tumor activity of anti-GD2 monoclonal antibody 220-51 against human neuroblastoma by granulocyte-macrophage colony-stimulating factor and granulocyte colony-stimulating factor." Int.J.Mol.Med.2. 471

Fukuda Minoru：“通过粒细胞巨噬细胞集落刺激因子和粒细胞集落刺激因子增强抗 GD2 单克隆抗体 220-51 抗人神经母细胞瘤的体外和体内抗肿瘤活性。”