CD3合成酵素遺伝子により誘導される細胞増殖シグナルの機構解析

CD3合酶基因诱导细胞增殖信号的机制分析

• 批准号: 10152223
• 负责人: 古川 鋼一
• 金额: $ 2.24万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10152223/
• 关键词: ガングリオシド; 糖脂質; 糖転移酵素; メラノーマ; GD3; PC12

ヒトのメラノーマやT細胞白血病に特異的に発現するGD3の細胞増殖における意義につき、GD3合成酵素遺伝子を種々の細胞に導入して、その表現型の変化を検討することにより解析した。まずラット褐色細胞腫PC12に、GD3合成酵素遺伝子を導入したトランスフェクタントでは、1.著しい増殖速度の亢進、2.神経成長因子(NGF)による分化誘導に対する不応、3.無血清処置によるアポトーシスへの抵抗性の獲得などが主な変化として観察された。著しい増殖能をもたらしたメカニズムの検討のため、NGF受容体TrkAのリン酸化、その下流のMAPキナーゼの活性化状態につき検討したところ、GD3合成酵素遺伝子導入細胞では、NGF刺激の有無に関わらず、TrkAのリン酸とMAPキナーゼの活性化を認めた。種々のキナーゼインヒビターを用いた増殖抑制実験の結果から、このトランスフェクタントで見られる増殖の亢進がTrkA/Ras/MAPキナーゼ系を介していることが示唆された。また、TrkAの二量体形成もNGF刺激に無関係に見られた。よって遺伝子導入によりTrkAの構造的変異が惹起され、恒常的な活性化状態を招いたと思われる。また、無血清培地によるアポトーシス誘導に対して、このトランスフェクタントは抵抗性を示したが、PI3キナーゼインヒビターのワルトマニン存在下ではアポトーシス抵抗性が消失した。よって、このトランスフェクタントでは糖鎖変化によってPI3キナーゼ活性が上昇していることが示唆された。これらの結果は、メラノーマやT細胞白血病の腫瘍増殖の機構の一部を反映するものと思われ、現在メラノサイトに対する遺伝子導入、糖脂質改変を行って、その細胞変化の検討を行っている。

The significance of GD3 cell proliferation in T-cell leukemia-specific development, introduction of GD3 synthase gene into cells, and analysis of phenotypic changes are discussed. 1. Increased proliferation rate; 2. No change in differentiation induction induced by NGF; 3. No change in resistance to serum-free treatment. We have also studied the proliferation potential, the acidification of the NGF receptor TrkA, and the activation status of the downstream MAP, the introduction of the GD3 synthase gene into the cells, the presence or absence of NGF stimulation, and the activation of TrkA's acid and MAP. The results of the growth inhibition of the species are shown in the TrkA/Ras/MAP system. There is no relationship between the two components of TrkA and NGF stimulation. The structure of TrkA is different from that of other genes, and the activation state of TrkA is constant. In the absence of serum, the resistance of the virus is reduced. The activity of PI3 increased in the presence of glucose. The results of this study include: 1. the mechanism of tumor growth in T cell leukemia; 2. the mechanism of gene transfer in T cell leukemia; 3. the mechanism of cell transformation in T cell leukemia.

项目成果

Iwanaga Masako: "Paroxysmal nocturnal haemoglobinuria clones in patients with myelodysplastic syndromes." Br.J.Haematol.102. 465-474 (1998)

Iwanaga Masako：“骨髓增生异常综合征患者的阵发性睡眠性血红蛋白尿克隆。”

Borgeld Harm-Jan Warner: "Appropriately spaced nuclear localizing signals are necessary for efficient nuclear import of non-nuclear proteins." Biochem.Biophys.Res.Commun.(in press).

Borgeld Harm-Jan Warner：“适当间隔的核定位信号对于非核蛋白的有效核输入是必要的。”

Fukuda Minoru: "Enhancement of in vitro and in vivo anti-tumor activity of anti-GD2 monoclonal antibody 220-51 against human neuroblastoma by granulocyte-macrophage colony-stimulating factor and granulocyte colony-stimulating factor." Int.J.Mol.Med.2. 471

Fukuda Minoru：“通过粒细胞巨噬细胞集落刺激因子和粒细胞集落刺激因子增强抗 GD2 单克隆抗体 220-51 抗人神经母细胞瘤的体外和体内抗肿瘤活性。”

Fukumoto Satoshi: "Expression cloning of mouse cDNA of CMP-NeuAc : lactosylceramide α2,3-sialyltransferase (GM3 synthase), an enzyme that initiates the synthesis of gangliosides." J.Biol.Chem.in press.

Satoshi Fukumoto：“CMP-NeuAc 的小鼠 cDNA 的表达克隆：乳糖神经酰胺 α2,3-唾液酸转移酶（GM3 合酶），一种启动神经节苷脂合成的酶，见 J.Biol.Chem.in press。”