遺伝子欠損マウスを用いたアポトーシス抑制に伴う発癌機構の解明

使用基因缺陷小鼠阐明与细胞凋亡抑制相关的致癌机制

基本信息

批准号：
14028033
负责人：
酒巻和弘
金额：
$ 2.11万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

カスパーゼ8は、デスレセプターを介するアポトーシス誘導に必要なだけでなく、ミトコンドリアからチトクロームCの流出が引き金となるアポトーシス誘導系においてもシグナルの増幅に欠かせない分子である。このためカスパーゼ8を欠損した細胞は、不死化の性質を獲得し癌化する可能性が考えられた。このことを検証するために本研究を行った。カスパーゼ8遺伝子欠損マウスより樹立した繊維芽細胞株(Caspase-8^<-/-> MEF細胞)は、Fasのようなデスレセプターからのアポトーシス誘導に対して抵抗性を示すが、軟寒天培地中では増殖できなかった。c-mycやK-rasを高発現した亜株においても軟寒天培地中では増殖能は認められず、がん細胞としての特異性を示さなかった。興味深いことに、Caspase-8^<-/-> MEF細胞は小胞体ストレスによるアポトーシス誘導に対しても抵抗性を示した。また、片側の染色体上のカスパーゼ8遺伝子が欠損したヘテロ接合型の変異マウスは、加齢と伴に種々の組織においてリンパ球系細胞からなる腫瘍が高頻度で発生することが確認された。しかし腫瘍細胞を正常なマウスに移植しても、新たに腫瘍は形成されず転移能を有していないことが判明した。これらの結果より、カスパーゼ8を欠いた細胞は免疫細胞等によるデスレセプターを介した細胞障害性活性に対して抵抗性を示し、生体の防御機構から逃れることができるが、カスパーゼ8欠損細胞が不死化及び癌化するためにはさらに遺伝的変異が必要であると考えられた。

caspase 8不仅对于死亡受体介导的细胞凋亡诱导是必需的，而且还是由线粒体Cytochrome C外排触发的凋亡诱导系统信号扩增的必不可少的分子。因此，人们认为缺乏caspase 8的细胞可能会获得永生并变成癌。进行了这项研究以验证这一点。由caspase 8基因缺陷（caspase-8^< - / - > MEF细胞）建立的成纤维细胞系具有抗性诱导死亡受体（例如FAS）的凋亡，但在软琼脂培养基中无法增殖。即使在高度表达的C-Myc和K-Ras的亚菌属中，也没有在软琼脂培养基中观察到增殖能力，也没有证明癌细胞的特异性。有趣的是，caspase-8^< - / - > MEF细胞也对内质网应激诱导凋亡具有抗性。还已经证实，染色体一侧缺乏caspase 8基因的杂合突变小鼠具有高频的肿瘤频率，由各种组织中的淋巴细胞细胞组成。但是，即使将肿瘤细胞植入正常小鼠，也没有形成新的肿瘤，也没有发现转移性潜力。这些结果表明，缺乏caspase 8的细胞对免疫细胞等对死亡受体介导的细胞毒性活性有抵抗力，并且可以逃避生物生物体的防御机制，但是人们认为，caspase 8缺陷细胞需要进一步的遗传突变才能变成永生和癌性。