がん細胞で生じる染色体不安定性を引き起こす分子機構の解明

阐明导致癌细胞染色体不稳定的分子机制

• 批准号: 14028063
• 负责人: 深川 竜郎
• 金额: $ 2.43万
• 依托单位: The Graduate University for Advanced Studies
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14028063/
• 关键词: がん化; 染色体不安定性; セントロメア; 坊錘体チェックポイント; DT40細胞; CENP-A; CENP-I; ZW250

染色体が安定に次世代細胞へと受け継がれていくことは、生物にとって最も基本的な性質である。染色体分配機構に狂いが生じると、染色体の異数化、がん化など生物に対して重大な悪影響が生じる。染色体の不安定性に関する基礎知見は、がんの生物学的特性を理解する上で重要である。我々はがん化と染色体不安定性の関係を理解するために、各種セントロメアタンパク質の機能解析を行っている。本年は、CENP-A、Mis6/CENP-1の進化的に配列が保存されたセントロメアタンパク質および、我々が新規に同定したタンパク質ZW250のノックアウト細胞を樹立して、セントロメアの形成機構ならびに細胞周期における機能を明らかにすることを目的とした。CENP-AとCENP-1の条件的ノックアウト株が作成でき、ZW250ノックアウト株の作成が進行中である。作成したノックアウト細胞についてはtetを添加した制限条件下で、細胞増殖の有無、細胞周期の進行や小型化染色体の安定性、微小管タンパク質や紡錘体チェックポイントタンパク質の異常、特殊顕微鏡装置を用いた生細胞観察、他のセントロメアタンパク質の細胞内局在等を解析した。その結果、CENP-1は、CENP-Aのセントロメアの局在へは関与せず、CENP-Cや-Hの局在へ関与することがわかった。また、CENP-1のノックアウト細胞は、BubR1に依存したチェックポイントタンパク質の活性化により細胞分裂期の進行が遅延することもわかった。さらに、特殊顕微鏡装置を用いた生細胞観察により、CENP-1タンパク質が失われた細胞の1細胞レベルでの挙動の可視化に成功した。異常微小管の形成過程をリアルタイムで観察でき、細胞分裂期での正確な遅延時間(800分)を計測することができた。

When chromosomes are stable, the cells of the next generation will be affected by changes in their processes. However, the most basic properties of living things are also present. Chromosome allocation mechanism, chromosome differentiation, and biological effects Basic knowledge of chromosomal instability is essential to understanding its biological properties. We are trying to understand the relationship between chemical and chromosomal instability, and analyze the function of various kinds of chromosomal instability. This year, CENP-A, MIS6/CENP-1 evolution of the alignment of the preservation of the state of the art, our new regulation of the same state of the art ZW250 and the use of state of the art cells to establish the state of the art, the formation of the state of the organization and the cell cycle function to clarify the purpose of this CENP-A and CENP-1 are in progress. To analyze cell growth, cell cycle progression, miniaturized chromosome stability, microtubule quality, spindle quality abnormality, special microscopical device, and other cell quality conditions under limited conditions. CENP-1, CENP-A, CENP-C, CENP-H, CENP-C, CENP-A, CENP-C, CENP-A, CENP-C, CENP-H, CENP-C, CENP-C, CENP-1 is dependent on BubR-1 for cell division and cell activation. In addition, special microscopes were used to observe the biological activity of CENP-1 cells. Abnormal microtubule formation process can be observed, cell division period can be measured correctly (800 minutes).

项目成果

深川竜郎: "染色体と細胞骨格の接点:キネトコア"細胞工学. 22巻・3月号. 267-271 (2003)

Tatsuo Fukakawa：“染色体和细胞骨架之间的相互作用：动粒”《细胞工程》第 22 卷，3 月号（2003 年）。

Eiichiro Sonoda: "International Congress Series 1246 "Generation and Phenotype Analysis of Conditionally Inactivated Mutant cells""Elsevia Science. 19 (2002)

Eiichiro Sonoda：“国际大会系列1246“条件失活突变细胞的生成和表型分析””Elsevia Science。

Ai Nishihashi: "CENP-I is essential for centromere function in vertebrate cells"Developmental Cell. Vol.2. 463-476 (2002)

Ai Nishihashi：“CENP-I 对于脊椎动物细胞的着丝粒功能至关重要”Development Cell。

Mizuki Ohno: "Triplex-forming DNAs in the human interphase nucleus visualized in situ by polypurine/polypyrimidine DNA probes and antitriplex antibodies"Chromosoma. Vol.111. 201-213 (2002)

Mizuki Ohno：“通过多嘌呤/多嘧啶 DNA 探针和抗三链体抗体原位可视化人间期核中形成三链体的 DNA”染色体。

Jenny M. Spence: "Co-localisation of Centromere Activity, CEN Proteins and a Topoisomerase II Cleavage Site to a fixed region of limited extent within the Human X α-satellite Locus DXZ1"The EMBO Journal. Vol.21. 5269-5280 (2002)

Jenny M. Spence：“着丝粒活性、CEN 蛋白和拓扑异构酶 II 切割位点在人类 X α-卫星基因座 DXZ1 内的有限范围内的共定位”EMBO 杂志第 5269-5280 卷。 2002）