ゲノム分配を司るセントロメア機能

控制基因组划分的着丝粒功能

• 批准号: 20247001
• 负责人: 深川 竜郎
• 金额: $ 30.78万
• 依托单位: National Institute of Genetics
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (A)
• 财政年份: 2008
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2008 至 2010
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20247001/
• 关键词: セントロメア; DT40細胞; 染色体分配; キネトコア; RNAiマシーナリー; CENPs; プロテオミクス; 細胞分裂

生物の生命維持には、ゲノム情報が安定に保持・増殖されなければならない。ゲノム複製・分配のような基本的な生体反応に狂いが生じると染色体の異数化、がん化など細胞に対する悪影響が生じる。したがって、ゲノム複製や分配の正確な分子機構を解明することは、遺伝学における本質的な課題の一つである。本研究では、ゲノム分配を司るセントロメアに焦点を当て、本年度は以下の2課題についての研究を行い、成果を挙げた1)セントロメアのクロマチンを構成する因子の同定および機能解析21年度までの研究で、セントロメアのクロマチン領域に存在する複数のタンパク質を同定している。本年度は、セントロメアクロマチンの詳細について次世代シーケンサーなどを活用したChIP-seq解析を行い、クロマチン内の分布を明らかにした。また、複数のタンパク質についてDT40細胞を用いてノックアウト細胞を樹立して表現型を解析した。2)キネトコアタンパク質複合体のin vitro再構成および構造解析我々は、これまで約20種類程度のセントロメア構成タンパク質を同定し、それらの機能について遺伝学と細胞生物学的手法を併用して解析してきた。ある程度の機能分担が細胞レベルで理解できた後は、タンパク質のin vitroでの再構成および構造学的解析が必要になると考えた。昨年度は、CENP-T/CENP-W複合体の再構成を試み、成功した。本年度は、このin vitroで再構成したCENP-T/CENP-WがDNAあるいは再構成ヌクレオソームと形式するのか、あるいはどのように結合しているのかについて、スーパーコイリングアッセイなどで明らかにした。また、CENP-T/CENP-W複合体の結晶化に成功して、X線構造学的解析も行なった。

Biological life maintenance に ゲノム, ゲノム intelligence が stability に preservation · proliferation されなければならな されなければならな. ゲ ノ ム copy, distribute の よ う な basic な raw body against 応 に crazy い が raw じ る の と chromosome anomaly, が ん change な ど cells に す seaborne る 悪 influence が raw じ る. し た が っ て, ゲ ノ ム copy や distribution の な correct molecular を interpret す る こ と は, but 伝 に お け る nature な topic の a つ で あ る. This study で は, ゲ ノ を ム distribution department る セ ン ト ロ メ ア に focus を when て, 2 topics below this year's は の に つ い て を い, の research を 挙 げ た 1) セ ン ト ロ メ ア の ク ロ マ チ ン を constitute す る factor の be お よ び function parsing the 21st annual ま で の research で, セ ン ト ロ メ ア の ク ロ マ チ に ン field exist す る plural の タ ン The パ substance を is the same as the <s:1> て る る る る. This year は, セ ン ト ロ メ ア ク ロ マ チ ン の detailed に つ い て nextgen シ ー ケ ン サ ー な ど を use し た ChIP - seq parsing を い, ク ロ マ チ ン を の distribution in Ming ら か に し た. ま た, plural の タ ン パ ク qualitative に つ い て DT40 cells を using い て ノ ッ ク ア ウ を ト cells establish し て phenotype を parsing し た. 2) the キ ネ ト コ ア タ ン パ ク qualitative complex の in vitro to constitute お よ び structure I 々 は, こ れ ま で degree of about 20 kinds の セ ン ト ロ メ ア constitute タ ン パ ク qualitative を with し, そ れ ら の function に つ い て heritage 伝 と cell biology technique を and し て parsing し て き た. あ る degree function of の share が cells レ ベ ル で understand で き た は, after タ ン パ ク qualitative の in vitro で の reconstitution お よ び tectonics of parsing が necessary に な る と exam え た. Yesterday 's annual み, CENP-T/CENP-W complex <s:1> reformation を attempt み, successful た た. This year は, こ の in vitro で reconstitution し た CENP - T/CENP - W が DNA あ る い は reconstitution ヌ ク レ オ ソ ー ム と form す る の か, あ る い は ど の よ う に combining し て い る の か に つ い て, ス ー パ ー コ イ リ ン グ ア ッ セ イ な ど で Ming ら か に し た. Youdaoplaceholder0, the <s:1> crystallization of the CENP-T/CENP-W complex に was successful て, and the analysis of X-ray structurology また rows なった.

项目成果

Vertebrate kinetochore protein architecture: protein copy number.

• DOI: 10.1083/jcb.200912022
• 发表时间: 2010-06-14
• 期刊: The Journal of cell biology
• 作者: Johnston K;Joglekar A;Hori T;Suzuki A;Fukagawa T;Salmon ED
• 通讯作者: Salmon ED

CCAN Makes Multiple Contacts with Centromeric DNA to Provide Distinct Pathways to the Outer Kinetochore

• DOI: 10.1016/j.cell.2008.10.019
• 发表时间: 2008-12-12
• 期刊: CELL
• 影响因子: 64.5
• 作者: Hori, Tetsuya;Amano, Miho;Fukagawa, Tatsuo
• 通讯作者: Fukagawa, Tatsuo

セントロメアDNAに結合するCENP-T複合体の機能解析

与着丝粒 DNA 结合的 CENP-T 复合物的功能分析

• 发表时间: 2008
• 作者: Fukagawa;T.;深川竜郎;岡田聖裕;堀哲也
• 通讯作者: 堀哲也

セントロメア特異的クロマチン構造の構築

着丝粒特异性染色质结构的构建

• 发表时间: 2008
• 作者: Kato;M.;山谷知行;深川竜郎
• 通讯作者: 深川竜郎

Structural dynamics of inner-kinetochore for faithful chromosome segregation

忠实染色体分离的内动粒结构动力学

• 发表时间: 2010
• 作者: Nagahama;Y.;長崎慶三・外丸裕司;Tatsuo Fukagawa
• 通讯作者: Tatsuo Fukagawa