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ゲノム分配を司るセントロメア機能

控制基因组划分的着丝粒功能

基本信息

批准号：
20247001
负责人：
深川竜郎
金额：
$ 30.78万
依托单位：
National Institute of Genetics
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (A)
财政年份：
2008
资助国家：
日本
起止时间：
2008 至 2010
项目状态：
已结题

项目摘要

生物の生命維持には、ゲノム情報が安定に保持・増殖されなければならない。ゲノム複製・分配のような基本的な生体反応に狂いが生じると染色体の異数化、がん化など細胞に対する悪影響が生じる。したがって、ゲノム複製や分配の正確な分子機構を解明することは、遺伝学における本質的な課題の一つである。本研究では、ゲノム分配を司るセントロメアに焦点を当て、本年度は以下の2課題についての研究を行い、成果を挙げた1)セントロメアのクロマチンを構成する因子の同定および機能解析21年度までの研究で、セントロメアのクロマチン領域に存在する複数のタンパク質を同定している。本年度は、セントロメアクロマチンの詳細について次世代シーケンサーなどを活用したChIP-seq解析を行い、クロマチン内の分布を明らかにした。また、複数のタンパク質についてDT40細胞を用いてノックアウト細胞を樹立して表現型を解析した。2)キネトコアタンパク質複合体のin vitro再構成および構造解析我々は、これまで約20種類程度のセントロメア構成タンパク質を同定し、それらの機能について遺伝学と細胞生物学的手法を併用して解析してきた。ある程度の機能分担が細胞レベルで理解できた後は、タンパク質のin vitroでの再構成および構造学的解析が必要になると考えた。昨年度は、CENP-T/CENP-W複合体の再構成を試み、成功した。本年度は、このin vitroで再構成したCENP-T/CENP-WがDNAあるいは再構成ヌクレオソームと形式するのか、あるいはどのように結合しているのかについて、スーパーコイリングアッセイなどで明らかにした。また、CENP-T/CENP-W複合体の結晶化に成功して、X線構造学的解析も行なった。

The life support of living things, the stability of life, the stability of life and the stability of life. To copy the distribution of the basic biological response, the number of chromosomes, the number of chromosomes, the number of cells, the number of cells, the number of chromosomes, the number of chromosomes, the number of chromosomes. Make sure that the molecular institutions understand how to solve the problems in the laboratory and how to copy them. In this study, the distribution department is responsible for the current focus of the following 2 projects in the following years. (1) the results of the study are the same as those in the field of financial research in the year 21. There are complex numbers in the field of research and research. This year, in the current year, and in the next generation in the next generation. Copy number, copy number 2) the whole body of in vitro is used to analyze and analyze the whole system. About 20 percent of the data are analyzed and analyzed. The level of the machine can be shared by the cell to understand the situation, and then to make an in vitro analysis of the need for further analysis. Last year, the CENP-T/CENP-W complex was reorganized into a successful one. This year, the in vitro will be re-issued into CENP-T/CENP-W, DNA, and then in the form of an emergency. This year, please tell me that you will learn more about this year. The crystallization of CENP-T/CENP-W complex was successful, and the analysis of X-ray structure was analyzed.