アデノウイルスDNA複製に必要な宿主因子の細胞内機能の解析

腺病毒DNA复制所需宿主因子的细胞内功能分析

• 批准号: 10159218
• 负责人: 松本 健
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: The Institute of Physical and Chemical Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10159218/
• 关键词: クロマチン; ヒストンシャペロン; 染色体脱凝縮

本研究では、鋳型活性化因子(Template ActivatingFactor-I,TAF-I,TAF-Iの細胞内機能を探るため、生化学的な解析が進んでいるアフリカツメガエルの系を用いてTAF-Iのクロマチン構造への影響を調べるとともに、細胞抽出液中でTAF-Iと相互作用する蛋白質を同定してそのほかの細胞内機能の可能性を含めた解析を目指して実験を行った。アフリカツメガエルの除膜化精子染色体にTAF-Iβをを添加することにより効率よくクロマチンの脱凝縮が起こることを見いだした。この系においてTAF-Iのもう一つのisoformであるTAF-Iαは非常に弱い活性しか示さなかった。また、変異体を用いた解析により、このクロマチン脱凝縮にはTAF-IのC末端に存在する酸性領域が必要であることを示した。精製ヒストンとTAF-IはGST-pulldown assayでは直接結合するにもかかわらず、精子クロマチン脱凝縮にさいしてはヒストンはほとんどクロマチンから遊離せず、TAF-Iが精子特異的塩基性蛋白質と直接結合することによりこれらの蛋白質をクロマチンからはずすことがわかった。TAF-1は、ヌクレオソームレベルだけでなく染色体の高次構造変化にも関与している可能性が考えられる。アフリカツメガエルのTAF-IβのcDNAをクローニングした結果、カエルのTAF-Iβも精子クロマチン脱凝縮を起こすことがわかった。卵抽出液中では、ヌクレオプラスミンが精子クロマチン脱凝縮を引き起こすことが知られているが、今回の結果は卵抽出液中のTAF-Iも同様の機能を持っていることを示唆するものである。

In this study, the activation factors (Template ActivatingFactor-I,TAF-I) of type Ⅱ and type Ⅱ were studied. TAF-I intracellular energy probe, biochemical analysis, biochemical analysis and biochemical analysis. The sperm chromosomes were delineated, TAF-I β was added, and the rate of decoagulation was increased. The activity of isoform is very weak and the activity of TAF-I α is very weak. The activity of TAF-I α is very weak. It is necessary to analyze the acid domain in the C-terminal of TAF-I by analyzing the acid domain. The basic proteins of TAF-I sperm and TAF-I sperm were directly combined with the basic proteins of sperm, sperm and sperm. The possibility of high-order chromosomal aberration is different from that of TAF-1 and normal chromosomes. The results of TAF-I β-cDNA and TAF-I β-sperm decoagulation were significantly higher than those of the control group. In the egg extract, the spermatozoa were detected in the egg extract and the sperm were decoagulated by the sperm decoagulation. the results showed that the TAF-I in the egg extract could be detected by the same machine in the egg extract.

项目成果

Matsumoto, K.et al.: "Nuclear history of a pre-mRNA determines the translational activity of cytoplasmic mRNA." The EMBO Journal. 17. 2107-2121 (1998)

Matsumoto, K. 等人：“前 mRNA 的核历史决定了细胞质 mRNA 的翻译活性。”

Matsumoto and Wolffe: "Gene regulation by Y-box proteins." Trends in Cell Biology. 8. 318-323 (1998)

Matsumoto 和 Wolffe：“Y-box 蛋白的基因调控。”