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改良遺伝子トラップ法による新規発生制御遺伝子の単離と機能解析

使用改进的基因捕获方法分离和功能分析新型发育调控基因

基本信息

批准号：
14034218
负责人：
浅野雅秀
金额：
$ 4.35万
依托单位：
Kanazawa University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至 2003
项目状态：
已结题

项目摘要

哺乳類の発生システムを理解するために、原腸陥入・中胚葉形成期に働く転写因子の下流に存在する発生制御遺伝子を、改良遺伝子トラップ法によって単離して、機能を解析することが本研究の目的である。Brachyury、HNF-3β、Pax1により発現調節されると考えられる遺伝子をトラップしたES細胞が4クローン得られたが、これまでに、Heterochromatin Protein(HP)1γとWilms' tumor 1-associating protein (WTAP)をトラップしたクローンより生殖系列キメラマウスが得られ、遺伝子変異マウスの作成に成功した。ヘテロ同士の交配を行ったところ、WTAPホモ変異マウスは胎生期に完全に致死であること、HP1γホモ変異マウスもごく一部生存するもののほとんどが胎生期に致死であることがわかり、改良遺伝子トラップ法により発生に必須の遺伝子が単離されてくることがわかった。トラップベクター内の発現マーカーであるLacZを用いて、それぞれの胚における発現パターンを調べた結果、HP1γは受精後5.5日より、WTAPは受精後3.5日より発現が検出でき、両遺伝子とも発生の非常に早い時期から発現が認められた。現在、死亡時期の同定と死亡原因の解明を行っているが、両遺伝子とも発生初期に重要な役割を担っている可能性が考えられる。今後、発生過程での発現パターンを詳細に明かにして、スクリーニングに用いたBrachyury、HNF-3β、Pax1によって、その発現が制御されているかどうかも明かにして行く予定である。

The purpose of this study is to understand the development process of mammals, to analyze the function of mammalian protoplasts, to analyze the downstream existence of reproductive control factors, and to improve the genetic analysis method. Brachyury, HNF-3β, Pax1, Heterochromatin Protein(HP)1γ Wilms' tumor 1-associating protein (WTAP), HNF-3 β, Pax 1 were successfully constructed. In this case, it is necessary to select a candidate for the post office of the Ministry of Health. The development of the embryo in the early stage of development, the development of the embryo in the early stage of development, and the development of the embryo in the early stage of development. Now, the time of death, the cause of death, the possibility of death, the early stage of life, the important stage of death, and the possibility of death. In the future, the development process of the development of the development of the environment in detail, the use of Brachyury, HNF-3 β, Pax 1, the development of the development of the control system in the middle of the process, the development of the development of the environment in detail, the development of the environment in the use of Brachyury, HNF-3β, Pax1, Pax1.