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転写因子FAST-1を用いた形態形成遺伝子の網羅的探索と機能解析

利用转录因子FAST-1对形态发生基因进行全面搜索和功能分析

基本信息

批准号：
14034253
负责人：
渡部稔
金额：
$ 4.35万
依托单位：
Gifu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至 2003
项目状态：
已结题

项目摘要

転写因子FAST-1はNodalシグナルの下流転写因子として、動物の形態形成に中心的な役割をはたしている。本研究では、cDNAアレイを用いてFAST-1の標的遺伝子をアフリカツメガエルより探索し、得られた遺伝子の機能解析を通じて、動物の初期形態形成に重要な遺伝子ネットワークを解明することを目的としている。平成15年度は、前年度のスクリーニングから得られたFAST-1標的候補遺伝子のうち、Zinc fingerタイプの転写因子をコードするXSPR-2b遺伝子についてさらにくわしい解析を行った。この遺伝子はアフリカツメガエルの初期発生の過程で、中胚葉や神経外胚葉の領域で強く発現していた。予定外胚葉を用いた実験では、XSPR-2b遺伝子はNodal/FAST-1シグナルだけでなくBMP、FGFシグナルによっても発現が誘導された。初期胚でXSPR-2b遺伝子を発現させると、中胚葉遺伝子(Xbra)の異所的な発現が誘導された。逆に機能阻害型のXSPR-2b遺伝子の発現により、胚でのXbraの発現が抑制された。これらの結果から、この遺伝子が中胚葉の形成・分化に関わっていることが強く示唆された。さらに転写の活性化型あるいは抑制化型に改変したXSPR-2b遺伝子の実験から、野生型のXSPR-2b遺伝子は転写の抑制化因子をコードしていることが示された。XSPR-2b遺伝子による中胚葉遺伝子の発現誘導の機能メカニズムを調べるために、XSPR-2b遺伝子の標的遺伝子のスクリーニングをcDNAアレイを用いて行ない、約150の標的遺伝子を得た。このうち約130の遺伝子の胚での発現パターンを現在までに調べている。今後はXSPR-2b遺伝子のさらに詳細な機能メカニズムの解析を行ない、中胚葉形成におけるXSPR-2b遺伝子の機能をあきらかにしていきたい。

Write FAST-1, Nodal, write, write The purpose of this study is to use the sub-device of the FAST-1 machine to explore the computer in this study. the results show that the sub-machine can analyze the communication machine, and the shape of the animal in the early stage is very important. In the 15th year of Pingcheng and the previous year, the waiting list of the FAST-1 was obtained. The Zinc finger wrote the factor, the XSPR-2b wrote the factor, the child analyzed the line. In the early stages of pregnancy, the birth process, mesoderm, ectoderm, ectoderm and ectoderm. The predetermined ectoderm was induced by Nodal/FAST-1, XSPR-2b, FGF, FGF, and so on. In the early stage of the embryo, the XSPR-2b and mesoembryonic embryos (Xbra) were detected. The reverse machine can block the XSPR-2b filter and the embryo Xbra can inhibit the growth of the virus. The results showed that the differentiation of the mesoderm was stronger than that of the control group. The active type, the active type, the inhibitory type, the active type, the active type, the inhibitory type, the active type, the active type, the inhibitory type, the active type, the active type, the inhibitory type, the active type, the active type, the inhibitory type, the active type, the active type, the inhibitory type, the active type, the active type, the inhibitory type, the active type, the active type, the inhibitory type, the active type, the active type, the inhibitory type, the active type, the active type, the inhibitory type, the active type, the active type, the inhibitory type, the active type, the active type, the inhibitory type, the wild type, the XSPR-2b type, The XSPR-2b and XSPR-2b substrates of the mesoderm and mesoderm can be detected by the operator and the operator, respectively, and the cDNA can be obtained by the operator and the operator by the operator. There are about 130 yuan in the womb, and the baby is in the middle of nowhere. In the future, the XSPR-2b machine will be able to analyze the line, the mesoderm, the XSPR-2b cell, the machine, the machine, and the machine.