内分泌攪乱物質のクロマチン修飾酵素複合体に対する影響

内分泌干​​扰物对染色质修饰酶复合物的影响

• 批准号: 14042234
• 负责人: 長田 茂宏
• 金额: $ 2.69万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14042234/
• 关键词: 内分泌攪乱物質; 環境ホルモン; 有機スズ化合物; クロマチン; ヒストン; ヒストンアセチル化酵素; 核内ホルモン受容体

内分泌攪乱物質(endocrine disruptor,ED)は世代を超える影響を生物に与えることが予想され、この作用点は多岐にわたっている。クロマチンはDNAを核内に収納する機能だけでなく、遺伝子機能制御にも関与している。クロマチン制御のひとつであるヒストン修飾は遺伝子発現制御に非常に重要であり、この異常は発生などに影響を与える。なかでもヒストンアセチル化は遺伝子活性化に強く関与している。性ホルモン受容体はEDの標的分子として注目されているが、これだけではEDの作用機構は説明できない点がある。そこで、ED作用機序を解析する目的で、ED容疑物質のヒストンアセチル化酵素(histone acetyltransferase,HAT)活性に対する影響を検討した。ラット肝臓核抽出液から粗精製したHAT分画、ラット肝臓由来ヒストン、トリチウム標識アセチルCoAを反応後、標識されたヒストンの放射活性によりにHAT活性を測定した。この反応系に試験化合物を添加し、HAT活性に対する影響を調べた。約20種類のED容疑物質を調べたところ、巻き貝に繁殖障害を引き起こす有機スズ化合物であるトリフェニルスズ(TPT)とトリブチルスズ(TBT)が濃度依存的にHAT活性を上昇させた。TPTとTBTは生体内において、ジフェニルスズ(DPT)、ジブチルスズ(DBT)、モノフェニルスズ(MPT)、モノブチルスズ(MBT)、無機スズに代謝される。これらの化合物のHAT活性に対する影響を調べた結果、DPT、DBTはHAT活性を促進したが、モノ体および無機スズは促進しなかった。有機スズ化合物が活性を促進するHATを同定する目的で、陰イオン交換カラムによりHATを分離し、その分画を用いて検討した。その結果、有機スズ化合物はすべてのHATの活性を促進するのではなく、特定のHATの活性を促進する可能性が示された。以上の結果より、エストロゲン受容体などの核内ホルモン受容体以外にHATがEDの標的分子になる可能性が示された。

Endocrine disruptor (ED) is a multi-functional substance that affects organisms from generation to generation. The function of DNA in the nucleus is related to the control of DNA. It is very important to control the occurrence of abnormal phenomena. It's a good idea to get rid of all the bad stuff. The target molecule of the receptor is described in detail. In order to analyze the mechanism of ED action, the effect of ED on the activity of histone acetyltransferase (HAT) was investigated. HAT analysis, purification and identification of liver nuclear extracts were carried out. HAT activity was measured after the detection of CoA and radioactivity. The effect of the addition of these compounds on HAT activity was investigated. About 20 kinds of ED-containing substances were found to be responsible for the increase of HAT activity in concentration-dependent manner. TPT and TBT are biological agents, such as DPT, DBT, MPT, MBT, and non-biological agents. The HAT activity of these compounds is regulated by DPT and DBT. Organic compounds are used for the purpose of promoting the activity of HAT, for the separation of HAT, and for the analysis of HAT. These results demonstrate the possibility that organic compounds can promote HAT activity. The above results indicate the possibility of HAT as a target molecule for ED outside of the nuclear receptor.