新しいポリグルタミン病SCA17(TBP病)のモデル動物系の作成と分子病態解析

新型多聚谷氨酰胺病SCA17（TBP病）模型动物系统的建立及分子病理学分析

• 批准号: 16015227
• 负责人: 中村 浩一郎
• 金额: $ 3.78万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16015227/
• 关键词: ポリグルタミン病; トランスジェニック; SCA17; TATA結合蛋白; モデル動物; 転写因子; 神経変性疾患

SCA17患者リンパ球を出発材料としてRT-PCRを行いTet-off gene expression systemであるpBI-EGFP vectorにヒト変異TBP cDNAの組み込みを行った。CAGがさらに伸長した変異TBPをPCRにて作成した(pBI-EGFP-TBP_Q37,56,98,168,199)。このpBI-EGFP-TBP_Q199 vectorのinsert部分を切り出し、microinjention法によりトランスジェニックマウスを作成した。産仔の尾DNAよりTBP配列およびEGFP配列を増幅するプライマーをそれぞれ用いてPCRにてtaransgeneを確認し、Q199トランスジェニックマウスを5株樹立した。Q199トランスジェニックマウス5株のF1すべてにおいて胚細胞導入が確認され、現在F3まで継代繁殖中である。F1〜F3において発達面、行動面、生存期間のいずれにおいても野生型との間に有意な差はなかった。Q199トランスジェニックマウスと交配するTet-Offマウス:B6.Tg-TgN(Eno2tTA)5021NesはJackson研究所より購入し、継代繁殖を行った。これらQ199トランスジェニックマウスとB6.Tg-TgN(Eno2tTA)5021Nesとを交配し、本研究の目的であるダブルトランスジェニックマウスが独立した5系統に得られた。現時点(最高齢1年4ヶ月)では明らかな表現型は確認されていないが、一部のラインにて被毛粗剛、体重減少、失調様歩行が観察された。

SCA17 gene expression system is developed by RT-PCR and pBI-EGFP vector. CAG was amplified by PCR (pBI-EGFP-TBP_Q37,56,98,168,199). The insert part of the pBI-EGFP-TBP_Q199 vector is cut out, and the microinjection method is completed. TBP alignment and EGFP alignment were increased by PCR and 5 strains were established. Q199: Embryonic cell introduction of 5 strains of Q199 was confirmed, and F3 generation propagation is under way. F1 ~ F3: development surface, action surface, survival period, wild type, intentional difference Q199 Tet-Off:B6.Tg-TgN(Eno2tTA)5021Nes Jackson Research Institute This study aims to establish a system of Q199 and Tg-TgN(Eno2tTA)5021Nes that can be used as an independent system. At the present time (the highest is 1 year and 4 months), the phenotype is confirmed, and some of the factors such as thick hair, weight loss and dysfunctional behavior are observed.