DNA組換え修復タンパク質群による発がん防御の分子機構

DNA重组修复蛋白保护癌症的分子机制

• 批准号: 16021251
• 负责人: 胡桃坂 仁志
• 金额: $ 2.5万
• 依托单位: Waseda University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16021251/
• 关键词: 遺伝子及び染色体; タンパク質と酵素; 構造生物学; X線結晶解析; 酵素異常; 生体高分子構造・機能; 染色体構築・機能・分配; 遺伝情報再編

がん化の原因となる二重鎖切断は、相同組換えを経由した"相同組換え修復"経路によって修復される。相同組換えでは、"相同的対合"と呼ばれる過程で物理的なDNA鎖の対合と交換が行われる。これまでに、相同的対合において働くと考えられるヒトのタンパク質として、Rad51、Rad51B、Rad51C、Rad51D、Dmc1、Rad52、Rad54、Rad54B、Xrcc2、Xrcc3等が報告されている。これらの遺伝子は細胞のがん化防御に重要であると考えられている。本研究では、Rad51パラログ(Rad51B、Rad51C、Rad51D、Xrcc2およびXrcc3)に着目した。Rad51パラログの欠損は、高頻度の染色体断裂を伴う染色体異常、シスプラチンやマイトマイシンCなどの抗がん剤への感受性充進、そしてX線に対する抵抗性の低下などが報告されており、細胞のがん化との関連が注目されている。そこで、まずヒト細胞内での存在が確認されている2種類の複合体(Xrcc3-Rad51C複合体およびBCDX2複合体)のうち、その解析が立ち後れているBCDX2複合体(Rad51B、Rad51C、Rad51D、Xrcc2)の再構成をリコンビナントタンパク質によって行った。そしてBCDX2複合体が組換え中間体であるHoliday構造やY型DNA構造に特異的に結合すること、強いアニーリング活性を有することなどを明らかにした。また、相同的対合反応の中心酵素Rad51は、白血病細胞においてTyr315が恒常的にリン酸化されるが、そのTyr315がポリマー形成に重要で、なおかつ単鎖DNAに対する結合部位に含まれることを明らかにした。さらに、Rad51のホモログであるDmc1の立体構造解析に成功した。ヒトDmc1は、8量体のリング構造を基本とする16量体のダブルリング構造を形成していた。

The reason for the がん lock is that the となる double lock is cut off, and the same group switch えを passage is repaired by the た た" same group switch え repair "passage によって repair される. The same group exchange えで えで, "the same pair "と call ばれる process で physical なDNA lock <s:1> pair と exchange が row われる. こ れ ま で に, same polices に お い て 働 く と exam え ら れ る ヒ ト の タ ン パ ク qualitative と し て, Rad51, Rad51B, Rad51C, Rad51D, Dmc1, Rad52, Rad54, Rad54B, Xrcc2 and Xrcc3 が report さ れ て い る. The <s:1> れら cultural heritage 伝 offspring cellular がん defense に important であると examination えられて る る る. In this study, で で and Rad51パラログ(Rad51B, Rad51C, Rad51D, Xrcc2およびXrcc3)に are the authors of た た. Rad51 パ ラ ロ グ は の owe loss and high frequency の chromosome break を う chromosome abnormality, シ ス プ ラ チ ン や マ イ ト マ イ シ ン C な ど の resistance が ん tonic へ の perceived susceptibility, fill with そ し て X-ray に す seaborne る resistance low の な ど が report さ れ て お り, cell の が ん change と の masato even が attention さ れ て い る. そ こ で, ま ず ヒ ト intracellular で の exist が confirm さ れ て い る 2 kinds の complex (Xrcc3 - Rad51C complex お よ び BCDX2 complex) の う ち, そ の parsing が made after ち れ て い る BCDX2 complex (Rad51B, Rad51C, Rad51D, Xrcc2) の reconstitution を リ コ ン ビ ナ Youdaoplaceholder2 トタ トタ パ パ によって mass によって line った. そ し て BCDX2 complex が group in え intermediates で あ る Holiday structure type や Y DNA に specific に combining す る こ と, strong い ア ニ ー リ ン グ activity を す る こ と な ど を Ming ら か に し た. ま た, same polices against 応 の center enzyme Rad51 は, leukemia cells に お い て Tyr315 が constant に リ ン acidification さ れ る が, そ の Tyr315 が ポ リ マ ー に important で, な お か つ 単 lock DNA に す seaborne る combining site contains に ま れ る こ と を Ming ら か に し た. Youdaoplaceholder0, Rad51 ホモログである, Dmc1 three-dimensional structure analysis に, successful た. ヒ ト Dmc1 は, 8 quantity body の リ ン グ construct basic と を す る 16 quantity body の ダ ブ ル リ ン を グ structure form し て い た.

项目成果

Positive role of the mammalian TBPIP/HOP2 protein in DMC1-mediate homologous pairing

哺乳动物 TBPIP/HOP2 蛋白在 DMC1 介导的同源配对中的积极作用

• 发表时间: 2004
• 期刊: Journal of Biological Chemistry 279
• 作者: Tanaka;Y.;Kurumizaka;H.;Yokoyama;S.;Takizawa Y. et al.;Enomoto R. et al.
• 通讯作者: Enomoto R. et al.

Expression and purification of recombinant human histones

• DOI: 10.1016/j.ymeth.2003.10.024
• 发表时间: 2004-05-01
• 期刊: METHODS
• 影响因子: 4.8
• 作者: Tanaka, Y;Tawaramoto-Sasanuma, M;Yokoyama, S
• 通讯作者: Yokoyama, S

Location of tyrosine 315, a target for phosphorylation by cAbl tyrosine kinase, at the edge of the subunit-subunit interface

酪氨酸 315 的位置，cAbl 酪氨酸激酶磷酸化的靶标，位于亚基-亚基界面的边缘

• 发表时间: 2004
• 期刊: Journal of Molecular Biology 339
• 作者: Conilleau;S. et al.
• 通讯作者: S. et al.

Structural basis for octameric ring formation and DNA interaction of the human homologous-pairing protein Dmc1

• DOI: 10.1016/s1097-2765(04)00218-7
• 发表时间: 2004-05-07
• 期刊: MOLECULAR CELL
• 影响因子: 16
• 作者: Kinebuchi, T;Kagawa, W;Yokoyama, S
• 通讯作者: Yokoyama, S

Preferential binding to branched DNA strands and strand- annealing activity of the BCDX2 complex

BCDX2 复合物优先结合支链 DNA 链和链退火活性

• 发表时间: 2004
• 期刊: Nucleic Acids Research 32
• 作者: Tanaka;Y.;Kurumizaka;H.;Yokoyama;S.;Takizawa Y. et al.;Enomoto R. et al.;Conilleau S. et al.;Yokoyama H. et al.
• 通讯作者: Yokoyama H. et al.