权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

染色体ダイナミクスに関わるタンパク質の構造・機能解析

参与染色体动力学的蛋白质的结构和功能分析

基本信息

批准号：
17050021
负责人：
胡桃坂仁志
金额：
$ 3.78万
依托单位：
Waseda University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2006
项目状态：
已结题

项目摘要

クロマチン構造の動的性質は、遺伝子の転写、ゲノムDNAの複製、染色体組換えなどに直接的な影響を及ぼす。本研究では、リコンビナントタンパク質を用いた試験管内クロマチン再構成系によって、クロマチンダイナミクスの構造基盤を明らかにすることを目的としている。クロマチン構造は、4種類のコアヒストン(Histones H2A,H2B,H3,H4)と146塩基対のDNAからなるヌクレオソームを基本構造とする。近年、これらのコアヒストンにはいくつかのバリアントが存在することが明らかになり、それらヒストンバリアントのクロマチン構造形成における重要性が指摘されつつある。そこで本年度は、ヒストンバリアントのうち、特にヒストンH3に着目し、そのバリアントであるヒストンH3.1、H3.2、H3.3、H3.1t、そしてセントロメア特異的ヒストンH3バリアントCENP-Aをリコンビナントとして発現精製することに成功した。これら全てのピストンH3バリアントを、ヒストンH4との複合体として精製し、それらのヌクレオソーム形成能を試験管内再構成系を用いて検討した。またヒストンH3バリアントのクロマチン構造形成における役割を調べるために、リコンビナントとして精製したこれらのヒストンH3バリアントの物理化学的および生化学的性質を種々の方法によって解析している。さらに、これらのピストンH3バリアントを用いた再構成ヌクレオソームを用いて、クロマチン構造ダイナミクスに重要な役割を果たす、ヒストンシャペロンNAP1、NAP2、そして新規ヒストンシャペロンPP2Cgammaのヌクレオソーム構造に及ぼす影響の解析を行っている。そのために必要な、NAP1、NAP2、PP2Cgammaを高純度にてリコンビナントタンパク質として精製する系の確立に成功した。

The nature of the structure of the genome is directly affected by DNA replication, genome transformation, and genetic engineering. In this study, we try to find out the structural basis of the reconstruction system in the tube. The basic structure of DNA is composed of four kinds of DNA fragments (Histones H2A, H2B,H3,H4) and 146 DNA fragments. In recent years, the importance of structural formation has been pointed out. This year, we have successfully completed the development of a number of projects, such as H3.1, H3.2, H3.3, H3.1t, H3.1, H3.2, H3.1, H3 The complex of H3 and H4 can be refined and reconstructed in the tube. A method for analysis of physicochemical and biochemical properties of the H3-derived protein in the formation of the H3-derived protein structure In addition, the application of the new system H3 to the application of the new system structure and the analysis of the influence of the new system structure on NAP1, NAP2 and NAP2 Cgamma on the application of the new system structure. NAP1, NAP2, PP2Cgamma, high purity, high purity.