ノルゾアンタミンの骨代謝に及ぼす作用機序解明

阐明去甲安他明对骨代谢的作用机制

• 批准号: 17035021
• 负责人: 福沢 世傑
• 金额: $ 1.54万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17035021/
• 关键词: スナギンチャク; ノルゾアンタミン; アルカロイド; 骨粗鬆症; 相互作用

ノルゾアンタミンの抗骨粗鬆症活性の作用機序を探索する目的で本年度はその産生生物内での生物学的意義に焦点を当てて研究を行った。刺胞動物の一種であるスナギンチャクは湿重量で0.1%以上ものゾアンタミン類を含んでいる。そしてゾアンタミン類は細胞毒性をほとんど示さない。なぜスナギンチャクは無毒なゾアンタミン類をこれほど大量に保有しているのか。一つの可能性として細胞骨格の一部を占めているのではないかと考え、この観点からスナギンチャク内に存在する脂質やタンパク質にどのような作用をするかを調べた。スナギンチャク内のリン脂質とコレステロールを定量したところ、スナギンチャク近傍に生息していたイワスナギンチャクとほぼ同程度であった。またノルゾアンタミンはリポソーム内にとどまらなかったことより、コレステロールのような膜補強の役割はしないと考察した。次にαヘリックスやβシート構造をとるペプチドに対し、その高次構造を乱す作用を示すことを見出した。続いてBSAを用いてタンパク質にどのような挙動を示すかを調べた。動的光散乱測定ではタンパク質の凝集を阻害し、ノルゾアンタミンが弱い相互作用を示すことが示唆された。またノルゾアンタミン1mM程度の高濃度条件下ではBSAの分解を防ぐことから、BSA表面に広く非特異的に分布して、一種のタンパク質保護作用を示していることが考えられた。このことはNMRを用いた飽和移動測定(Saturation Transfer Difference NMR)によってノルゾアンタミンのA環のエノン部分がBSA表面に近接している事実からも支持された。BSAなどのアルブミン類は生体内に普遍的かつ比較的大量に存在する可溶性タンパク質群ある。もしゾアンタミン類がタンパク質に普遍的に相互作用するならば親和性の低さを補うために多量に存在することが必要となる。すなわちスナギンチャク内に大量に存在することは低い親和性でタンパク質と相互作用するための必然であると解釈できる。すなわちスナギンチャクはこのようなタンパク質安定効果を期待してゾアンタミン類を大量に保存しているのではないか。BSA自身はスナギンチャク内に存在しないので、細胞骨格の一翼を担うタンパク質としてコラーゲンについて同様の実験を行った。内在性のプロテアーゼによる分解の可能性を否定するためにコラーゲンを加熱処理し、紫外線照射を行ったところノルゾアンタミンの添加がコラーゲンの分解を抑制している結果を得た。すなわちタンパク質の分解は内在性の酵素によるものではなく酸化による分解を示唆しており、ノルゾアンタミンが一種の抗酸化作用を示す知見を得た。スナギンチャクは直射日光にさらされた環境で生息しており、紫外線照射によって生じる様々な活性酸素種から身を守るためにゾアンタミン類の鎧のように身にまとっている可能性がある。そしてこの知見は報告されている抗骨粗鬆症活性の作用機序のひとつのヒントを与えているのではないかと考えている。

ノ ル ゾ ア ン タ ミ ン の の resistant coarse loose bone disease activity machine sequence を explore す で る purpose this year は そ の produce biological within で の biological significance に focus を when て を line っ て research た. Cnidans are a species of であるスナギ, チャ, <s:1>, <s:1>, で, with a wet weight of で0.1% or more. They are <s:1>, ゾア, タ, タ, <s:1>, を, including んで, る, る, and る. Youdaoplaceholder0, そ, てゾア, タ, タ, てゾア cytotoxicity をほとん, さな, さな. な ぜ ス ナ ギ ン チ ャ ク は non-toxic な ゾ ア ン タ ミ ン class を こ れ ほ ど large に retain し て い る の か. A つ の possibility と し bone の a を て cells め て い る の で は な い か と え test, こ の 観 point か ら ス ナ ギ ン チ ャ ク に exist within す る lipid や タ ン パ ク qualitative に ど の よ う な role を す る か を adjustable べ た. Within ス ナ ギ ン チ ャ ク の リ ン lipid と コ レ ス テ ロ ー ル を quantitative し た と こ ろ, ス ナ ギ ン チ ャ ク nearly alongside に interest-bearing し て い た イ ワ ス ナ ギ ン チ ャ ク と ほ ぼ with degree で あ っ た. ま た ノ ル ゾ ア ン タ ミ ン は リ ポ ソ ー ム within に と ど ま ら な か っ た こ と よ り, コ レ ス テ ロ ー ル の よ う な membrane cut は reinforcing の service し な い と investigation し た. Time に alpha ヘ リ ッ ク ス や beta シ ー ト tectonic を と る ペ プ チ ド に し, seaborne そ の high secondary tectonic を disorderly を す role す こ と を shows し た. 続 い て BSA を with い て タ ン パ ク qualitative に ど の よ う な 挙 dynamic を shown す か を adjustable べ た. Determination of moving light scattered で は タ ン パ ク qualitative の agglutination を resistance against し, ノ ル ゾ ア ン タ ミ ン が weak い interaction を shown す こ と が in stopping さ れ た. ま た ノ ル ゾ ア ン タ ミ ン の 1 mm degree under the condition of high concentration で は BSA の decomposition を anti ぐ こ と か ら, BSA surface に hiroo く に distribution of nonspecific し て, a の タ ン パ を ク quality protection role し て い る こ と が exam え ら れ た. こ の こ と は NMR を with い た saturated mobile measurement (Saturation Transfer Difference NMR) に よ っ て ノ ル ゾ ア ン タ ミ ン の A ring の エ ノ ン part が BSA surface に nearly meet し て い る things be か ら も support さ れ た. BSA な ど の ア ル ブ ミ ン は raw body に common か つ compared a number に す る soluble タ ン パ ク mass group あ る. も し ゾ ア ン タ ミ ン class が タ ン パ ク qualitative に common に interaction す る な ら ば affinity の low さ を fill う た め に に exist abundant す る こ と が necessary と な る. す な わ ち ス ナ ギ ン チ ャ ク に within a number に す る こ と は い low affinity で タ ン パ ク qualitative と interaction す る た め の inevitable で あ る と solution 釈 で き る. す な わ ち ス ナ ギ ン チ ャ ク は こ の よ う な タ ン パ ク quality stability and sharper fruit を expect し て ゾ ア ン タ ミ ン を a lot に save し て い る の で は な い か. BSA itself は ス ナ ギ ン チ ャ ク に exist within し な い の で, cell skeleton の wing を bear う タ ン パ ク qualitative と し て コ ラ ー ゲ ン に つ い て with others の be 験 を line っ た. Internality の プ ロ テ ア ー ゼ に よ る decomposition possibility の を negative す る た め に コ ラ ー ゲ ン を heating 処 し, ultraviolet irradiation を line っ た と こ ろ ノ ル ゾ ア ン タ ミ ン の add が コ ラ ー ゲ ン の decomposition を inhibit し て い た を る results. す な わ ち タ ン パ ク qualitative の decomposition は internality の enzyme に よ る も の で は な く acidification に よ を る decomposition in stopping し て お り, ノ ル ゾ ア ン タ ミ ン が a の resistance acidification を す knowledge in を た. ス ナ ギ ン チ ャ ク は point-blank sunlight に さ ら さ れ た environment で interest-bearing し て お り, ultraviolet irradiation に よ っ て raw じ る others 々 な acid active element of か ら body keep を る た め に ゾ ア ン タ ミ ン class の armoured の よ う に body に ま と っ て い る possibility が あ る. そ し て こ の knowledge は report さ れ て い る の resistant coarse loose bone disease activity machine sequence の ひ と つ の ヒ ン ト を and え て い る の で は な い か と exam え て い る.

项目成果

On-probe sample preparation without washes for matrix assisted laser desorption ionization mass spectrometry based on a combination of electrostatic interactions and a molecular sieve effects.

基于静电相互作用和分子筛效应相结合的基质辅助激光解吸电离质谱的探针上样品制备，无需清洗。

• 发表时间: 2005
• 期刊: Analytical Chemistry 77
• 作者: Fukuzawa;S.;Asanuma;M.;Tachibana;K.;Hirota H.
• 通讯作者: Hirota H.

Regioselective Carbon-Carbon Bond Formation in Proteins by Palladium-catalysis ; New Protein Chemistry by Organometallic Chemistry. 2

通过钯催化在蛋白质中形成区域选择性碳-碳键；

• 发表时间: 2006
• 期刊: ChemBioChem 7
• 作者: Kodama;K.;Fukuzawa;S.;Nakayama;H.;Kigawa;T.;Sakamoto;K.;Yabuki;T.;Matsuda;N.;Shirouzu;M;Takio;K.;Tachibana;K.;Yokoyama;S.
• 通讯作者: S.