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生体分子のイオン液体への均一可溶化と新規分析場への応用

生物分子在离子液体中的均匀溶解及其在新分析领域的应用

基本信息

批准号：
18045027
负责人：
後藤雅宏
金额：
$ 2.88万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

项目摘要

本年度は,酵素をポリエチレングリコール(PEG)で化学修飾することにより、イオン液体に均一に可溶化し飛躍的に酵素活性が向上することを明らかにした。イオン液体は不揮発性であるため溶媒の損失がなく、酵素にとって不可欠な溶媒和された環境を半永久的に維持することができる。さらに、イオン液体は疎水性と高極性を同時に示すという特異的溶媒物性のため、環境ホルモンのような疎水性の高い化合物からペプチド・多糖といった高極性の生理活性物質まで溶解しうるため、幅広い化合物をターゲットとすることができる。本年度の大きな成果として,イオン液体中での酵素活性を分光学的手法を用いて迅速かつ簡便に解析する手法の開発を行うことができた。具体的には,エタノール等のアルコール類を求核剤とすることで酵素反応により発色団の遊離が確認された。また、その反応速度は酵素濃度に依存し、発色反応が酵素の触媒作用によるものであることを示した。また、スブチリシンとα-キモトリプシンという2種類のプロテアーゼとそれぞれの酵素に対する基質を用いて反応を行ったところ、各酵素に対する基質を用いた時のみ発色反応が見られ、イオン液体中においても酵素の厳密な基質特異性が維持されていることが示された。本手法は、イオン液体に基質と酵素を加えるだけでリアルタイムに酵素活性を評価できる極めて迅速・簡便な分析系である。そのため反応条件を種々変化させて酵素活性を調査する速度論解析において非常に有効であり、イオン液体中における酵素反応の動力学パラメータを簡便に算出することが可能となった。

This year, the enzyme activity of the enzyme (PEG), the chemical modification, the enzyme activity, the soluble enzyme activity, the soluble enzyme activity, the enzyme activity. The use of liquids and enzymes must not be owed to the semi-permanent maintenance of the solvent and the environment. At the same time, the high concentration of water-borne substances in liquids and liquids shows the characteristics of solvent properties, environmental conditions, water-borne compounds, polysaccharides, and physiologically active substances, such as dissolved and amplitude compounds. The results of this year's great achievements have been achieved by using optical methods to determine the activity of enzymes in liquids by means of rapid analysis and analysis. For specific information, please confirm that the enzyme is sensitive to the color of the enzyme. Speed, speed, enzyme degree dependence, color reaction, enzyme catalysis, catalyst, enzyme, enzyme, enzyme. This is the first time that each enzyme has been used in the first place, and that the enzyme in the liquid is sensitive to the temperature of the enzyme in the liquid. This technique, liquid, enzyme, enzyme, enzyme activity, enzyme activity The analysis of the speed theory of the enzyme activity of the enzyme in the reaction condition, the enzyme in the liquid, the enzyme in the liquid, the enzyme activity, the temperature, the temperature and the temperature.