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DNA界面活性剤を利用したベシクルナノリアクターの反応制御

利用DNA表面活性剂控制囊泡纳米反应器的反应

基本信息

批准号：
17656271
负责人：
後藤雅宏
金额：
$ 2.18万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2006
项目状态：
已结题

项目摘要

近年、任意の配列・長さを持ったDNAを容易に合成・修飾することが可能となり、DNAは遺伝子以外の機能を持った`ナノ構造体制御素子'として注目されている。本研究では、相補的なDNAを膜表面に組み込んだリポソームを調製し、DNAの特異的な二本鎖形成能を利用して、秩序性を持った会合体の形成-崩壊の制御について検討した。1)会合体の形成と温度応答性相補的な24mer DNA界面活性剤を挿入したそれぞれのリポソームを混合し、室温で静置した結果、凝集体が形成された。この凝集体をTEM観察した結果、調製した200nmサイズのリポソームが数多く集まって形成されていることが確認された。リポソームにDNAを組み込むことにより、リポソームの会合体を形成できることが示された。2)会合体の温度応答性24mer DNA界面活性剤を挿入したリポソームで会合体を形成した後、繰り返し昇温(70℃)、降温(30℃)させ、450nmにおける濁度変化をUVにより測定した。その結果、昇温、降温によって、濁度の上昇、低下が連続して起こり、DNAの解離・結合により、会合体の形成・崩壊が制御可能であることが明らかとなった。3)塩濃度変化による会合体制御リポソームDNA複合体調製時の緩衝液濃度を2mMに下げ、会合体形成に及ぼす塩強度の効果を検討した。UVにより450nmの濁度測定を行った結果、DNA界面活性剤を挿入したリポソームを混合後も、濁度の上昇は見られなかった。そこで、DNAの結合を促進させるため、MgCl_2を10mM添加した。その結果、Fig.3に示すように、極短時間で濁度の上昇が確認された。DNAにより、リポソーム会合体を形成させる場合、塩強度が高いほどDNAの二本鎖形成(ハイブリダイゼーション)が促進され、リポソームが会合しやすいことが示された。

In recent years, arbitrary alignment and length of DNA can be easily synthesized and modified, and functions other than DNA gene can be maintained. In this study, we investigated the molecular structure of DNA membrane, and the molecular structure of DNA membrane 1)The formation of aggregates is temperature dependent and the interfacial activity of 24mer DNA is stable. The results of TEM observation of this condensation group, modulation of 200nm particles and the formation of multiple particles were confirmed. The DNA of the hybrid system is divided into two groups. 2)The temperature response of 24-mer DNA was measured by UV after formation, temperature rise (70℃), temperature drop (30℃) and turbidity change at 450nm. Results: Temperature rise, temperature drop, turbidity rise, temperature drop, DNA dissociation, DNA binding, DNA fusion formation, DNA breakdown, and control possibility. 3) The concentration of buffer solution in the preparation of DNA complex was changed from 2mM to 2mM, and the formation of DNA complex and the strength of DNA complex were discussed. UV turbidity measurement results at 450nm, DNA interfacial activity, and turbidity increase after mixing DNA binding was promoted by adding MgCl_2 at 10 mM. The results, Fig. 3, show that the turbidity rise in a very short time is confirmed. DNA fusion is promoted by high intensity DNA fusion.