温度応答性逆相ミセルの設計とタンパク質分離への応用

温度响应型反相胶束的设计及其在蛋白质分离中的应用

• 批准号: 07750851
• 负责人: 後藤 雅宏
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07750851/
• 关键词: 逆ミセル; タンパク質; 抽出; 分離; パーコレーション; 酵素; リゾチーム; キモトリプシン

新しく開発した界面活性剤ジオレイルリン酸(DOLPAと略記)および従来の界面活性剤AOTからなる逆ミセルについて、電気伝導度の温度依存性を検討した。その結果、ある温度を境として、電気伝導度が急激に上昇する現象(パーコレーション挙動)を観察することができた。また、この現象が外部温度に応答して可逆的に起こることを確認できた。さらに上記パーコレーション挙動に対して熱力学的解析を行った結果、ドライビングフォースは正に大きなエントロピーの寄与であることが明かになった。また、逆ミセルに取り込まれたタンパク質の回収について詳細に検討した結果、逆ミセルの溶液に、微量のアルコールを添加することによって、効率良くタンパク質を回収できることを明らかにした。さらに、回収されたタンパク質(リゾチーム、α-キモトリプシン、チトクロームC,ヘモグロビン)の酵素活性を測定した結果、各分離工程において、酵素の活性を低下させることなく、抽出分離操作を効率よく行えることが示された。さらに、回収した逆ミセルの溶液を繰り返し使用した結果、3回の抽出-逆抽出分離操作においても抽出能力が低下することなく、安定にタンパク質の分離操作が行えることが明かとなった。このため、新たに構築された逆ミセル溶液が、微量タンパク質の分離濃縮媒体として、非常に有効であることが示された。

The new interface activity (DOLPA) is sensitive to the interface activity (AOT), the temperature dependence of the temperature, the temperature dependence of the temperature. The results of the test, the temperature temperature, the temperature, the The temperature is similar to the external temperature. The answer is reversible. On the basis of the results of the analysis of the mechanics of the computer, the results of the analysis and the results of the analysis of the mechanics of the mechanical system, the results of the analysis, the results, and the results. The results of the results, the solution of the solution, the trace amount of the solution, the addition of the drug, the rate of improvement, the accuracy of the test, the results of the results, the solution, the solution, the solution The results of the determination of enzyme activity, the results of the determination of enzyme activity, the results of the determination of enzyme activity, the results of the determination of enzyme activity, the results of the determination of enzyme activity, the results of the determination of enzyme activity, the results of the determination of enzyme activity, the results of the determination of enzyme activity, the results of the determination of enzyme activity, the results of enzyme activity test, the results of enzyme activity test Use the results of the reverse extraction-reverse extraction separation operation, the extraction ability is low, and the diazepam separation operation is effective. This is the first time that the solution has been reversed, the trace amount has been separated, the media has been separated, and the media has been shown to be sensitive.

项目成果

M.Goto et al.,: "Novel preparation method for surfactant-coated enzymes using W/O emulsion" Biotechnology Techniques. 9. 101-104 (1995)

M.Goto 等人：“使用 W/O 乳液制备表面活性剂包被酶的新方法”生物技术。

N.Kamiya et al.,: "Surlactant-coated lipase suifable for the euzymatic resolution of menthol as a biocatalyst in organic media21GC06:Biotechnology Progress" 11. 270-275 (1995)

N.Kamiya 等人，：“表面活性剂包被的脂肪酶适用于有机介质中作为生物催化剂的薄荷醇的酶促拆分21GC06：生物技术进展”11. 270-275 (1995)

M.Goto et al.,: "Protein extraction by new reversed micelles with di(tridecy1)phosphoric acid" Separation Science & Technology22GD02:30. 88-99 (1995)

M.Goto 等人：“用二（十三烷基）磷酸通过新型反胶束提取蛋白质” 分离科学

M.Goto et al.,: "Enzymatic in teresterification of trigly ceride with surfactant-coatedlipase in organic media" Biotechnology & Bioengineering. 45. 27-32 (1995)

M.Goto 等人：“在有机介质中用表面活性剂包被的脂肪酶进行甘油三酯的酯化反应”生物技术

M.Goto et al.,: "Reversed micelles recognize an active protein" Biotechnology Technigues. 10. 141-144 (1996)

M.Goto 等人：“反向胶束识别活性蛋白质”生物技术。