エンドソームにおける膜輸送の蛋白質脱ユビキチンヒによる調節

蛋白质去泛素对内涵体膜运输的调节

• 批准号: 18050011
• 负责人: 駒田 雅之
• 金额: $ 3.84万
• 依托单位: Tokyo Institute of Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18050011/
• 关键词: 癌; 酵素; 細胞・組織; 蛋白質

脱ユビキチン(Ub)化酵素UBPYと共免疫沈降してくる結合タンパク質を質量分析を用いて同定した結果、14-3-3タンパク質がUBPYと結合することが明らかとなった。14-3-3タンパク質はこれまでに200種類以上の細胞内タンパク質と結合することが知られており、多くの場合、標的タンパク質のリン酸化依存的に結合してその酵素活性や細胞内局在などを制御する調節タンパク質である。14-3-3タンパク質はUBPYに存在する14-3-3結合コンセンサス配列RSYS^<680>SPにSer^<680>のリン酸化依存的に結合すること、この結合よりUBPYの酵素活性が抑制されることが明らかとなった。さらに、細胞分裂期にSer680が脱リン酸化されて14-3-3が解離しUBPYの酵素活性が上昇することがわかった。したがってUBPYが細胞分裂期に特異的な何らかの機能を有することが示唆された。そこで細胞分裂期におけるUBPYの局在を調べた結果、細胞質分裂の最終ステージにcentral spindleに局在することが明らかとなった。また、エンドソームで機能するもう1つの脱Ub化酵素AMSHもcentral spindleに局在することを見出した。さらにその領域で一過的に強いタンパク質Ub化が起きることを見出した。RNAiを用いた実験から、UBPYとAMSHは効率のよい細胞質分裂に不可欠であることが明らかとなった。さらに、central spindleにおいてUb化されるタンパク質の1つとして、細胞質分裂の際の膜融合に必要なv-SNAREタンパク質VAMP8を同定した。VAMP8がUBPYとAMSHによって脱Ub化されることも示された。これらの結果から、細胞質分裂がVAMP8を含むタンパク質のUb化と脱Ub化によりダイナミックに制御されていることが示唆された。

使用质谱法鉴定了与去泛素化（UB）酶共免疫沉淀的结合蛋白，并发现14-3-3蛋白与Ubpy结合。已知14-3-3蛋白与200多种类型的细胞内蛋白结合，在许多情况下，它是一种调节蛋白，与靶蛋白的磷酸化依赖性方式结合，以控制其酶活性和细胞内定位。结果表明，14-3-3蛋白与14-3-3结合共识序列rsys^<680> sp结合，以磷酸化依赖性方式存在于Ubpy中，并且这种结合抑制了Ubpy的酶活性。此外，发现Ser680在细胞分裂期间被脱磷酸化，分离为14-3-3，从而增加了Ubpy的酶活性。因此，提出Ubpy具有特定于有丝分裂相的功能。因此，我们研究了细胞分裂阶段Ubpy的定位，并发现它位于细胞动物的最后阶段的中心主轴上。我们还发现，在内体中起作用的另一个Deubase Amsh也位于中央主轴上。此外，发现该地区突然发生了强蛋白UB。使用RNAi的实验表明，Ubpy和AMSH对于有效的细胞因子至关重要。此外，我们确定了v-snare蛋白VAPM8，这是细胞因子过程中膜融合所必需的，它是在中央纺锤体中渗透的蛋白质之一。还表明VAMP8被Ubpy和Amsh取代。这些结果表明，细胞因子受到含VAMP8的蛋白质的胰化和去育动态调节。

项目成果

Regulation of endosomal cargo sorting by deubiquitinating enzymes.

通过去泛素化酶调节内体货物分选。

• 发表时间: 2007
• 期刊: Research Advances in Biological Chemistry
• 作者: Komada;M.
• 通讯作者: M.

キイロショウジョウバエにおける脱ユビキチン化酵素UBPYの機能解析

果蝇去泛素化酶 UBPY 的功能分析

• 发表时间: 2007
• 作者: Komada;M.;寺田 信生;花房洋;佐藤裕介;佐藤裕介;花房洋;遠藤彬則;遠藤彬則;駒田雅之;駒田雅之;向井明子;駒田雅之;駒田 雅之;遠藤 彬則;若林 香菜子;向井 明子
• 通讯作者: 向井 明子

Disuifide bond forthation plays a xrucial role in protein stabilty of human ABCG2

二硫键形成对人 ABCG2 的蛋白质稳定性起着至关重要的作用

• 发表时间: 2007
• 作者: Brownstein CA;Adler F;Nelson-Williams C;Iijima J;Li P;Imura A;Nabeshima Y;Reyes-Mugica M;Carpenter TO;Lifton RP.;Tomoo Shimada;Arowu Tanaka;T.Suzuki et al.;若林 香菜子
• 通讯作者: 若林 香菜子

神経繊維ランビエ絞輪部近傍の軸索構築に関するタンパク質間相互作用

与神经纤维朗飞环附近轴突结构相关的蛋白质-蛋白质相互作用

• 发表时间: 2007
• 期刊: 生体の科学 58
• 作者: Komada;M.;寺田 信生
• 通讯作者: 寺田 信生

エンドソームで働く脱ユビキチン化酵素UBPYの活性調節とその意義

内体中去泛素化酶UBPY活性的调控及其意义

• 发表时间: 2007
• 作者: Komada;M.;寺田 信生;花房洋;佐藤裕介;佐藤裕介;花房洋;遠藤彬則;遠藤彬則;駒田雅之;駒田雅之;向井明子;駒田雅之;駒田 雅之
• 通讯作者: 駒田 雅之