C型肝炎ウイルスの増殖適応変異と病原性の研究

丙型肝炎病毒生长适应性突变及致病性研究

• 批准号: 19041047
• 负责人: 堀田 博
• 金额: $ 5.06万
• 依托单位: Kobe University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 2008
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19041047/
• 关键词: ウイルス; 遺伝子; 感染症

HCV J6/JFH-1株をHuh-7.5細胞で27、38、47代継代したウイルス株(P-27、P-38、P-47)は、親株に比べて50〜300倍高い感染性ウイルス粒子産生能を示した。P-27には8ヵ所(E2に4ヵ所、NS2に2ヵ所、NS5AとNS5Bに1ヵ所ずつ)のアミノ酸変異がみられ、P-38では上記8ヵ所に加えてCoreに1ヵ所、P-47では更に5'-UTRとNS5Bに1ヵ所ずつの変異がみられた。reverse genetics法により親株にP-27で見られた8ヵ所の変異をすべて導入すると感染性ウイルス粒子産生能が約10倍増加することを確認した。しかし、7ヵ所以下の部分的変異導入では感染性ウイルス粒子産生能の有意な増加は観察されなかった。P-27は親株に比べて抗CD81抗体による吸着阻害を受けにくく、その性質はE2の単一変異(N534H)によるものであった。この変異によるE2の糖鎖付加の欠失が、ウイルスレセプターとの相互作用に影響を及ぼして、HCVの感染効率を増加させている可能性が考えられた。さらに、P-27ではウイルス遺伝子複製能とウイルスタンパク質合成能が親株に比べて軽度増加していた。このような複数の変異が複合的に作用して顕著な感染性ウイルス粒子産生能の増加をもたらしたものと考えられた。また、HCV感染細胞と非感染細胞を用いてプロテオーム解析を行い、感染の持続に伴って発現が減少する宿主タンパク質として、FABP1を同定した。FABP1は脂肪酸取込みに重要な役割を果たしているが、HCV感染によるFABP1発現の低下が、細胞の脂質代謝等にどのように影響を及ぼしているかについて、現在解析を進めている。同様に、肝細胞への糖取込みに重要な役割を果たしているGLUT2の発現がHCV複製により抑制されることも明らかにした。mRNA定量やルシフェラーゼレポーターを用いたプロモーターアッセイにより、GLUT2発現の抑制が転写レベルでおこっていること、及び肝細胞において重要な転写因子HNF1αが関与することを明らかにした。HCVが肝細胞の糖・脂質代謝異常を引き起こす分子機序を考える上で興味ある知見である。

HCV J6/JFH-1 strain was 50 - 300 times more infectious than HCV J6/JFH-1 strain at passages 27, 38, and 47. HCV J6/JFH-1 strain was able to produce infectious particles at passages 27, 38, and 47. HCV J6/JFH-1 strain was also able to produce infectious particles at passages 27, 38, and 47. HCV J6/JFH-1 strain was also able to produce infectious particles at passages 27, 38, and 47. The P-27 has 8 different positions (E2 has 4 different positions, NS2 has 2 different positions, NS5A has 1 different position, NS 5B has 1 different position), the P-38 has 8 different positions, the P-47 has 5'-UTR has 1 different position, NS 5B has 1 different position. The reverse genetics method was used to confirm that the infectivity of P-27 was increased by about 10 times. 7. Some of the differences in the introduction of infectious particles can be intentionally increased. P-27 has the same properties as the parent strain (N534H). The possibility of increasing HCV infection rate due to the interaction between E2 and HCV is examined. In addition, P-27 has increased the reproduction ability of its parent plants compared with its parent plants. The effect of the complex is to increase the number of particles produced. HCV infection and non-infected cells were analyzed in the same way, and the host quality and FABP1 were also determined. FABP1 plays an important role in fatty acid metabolism, HCV infection, decreased FABP1 expression, cellular lipid metabolism, etc. In the same way, the expression of GLUT2 in liver cells is important for inhibiting HCV replication. mRNA Quantification and Expression of HNF1 α in Hepatocytes HCV is the first to cause abnormal glucose and lipid metabolism in liver cells.

项目成果

Recent advances in the pathogenesis and treatment of hepatitis C viru infections

丙型肝炎病毒感染的发病机制和治疗新进展

• 发表时间: 2008
• 作者: Ohtaki;et. al.;朝長ら;Bungyoku Yasuaki;Kasai Daisuke;Kim Soo Ryang;Inubushi Sachiko;EI-Shamy Ahmed;Sasase Noriko;Lusida Maria Inge;Inubushi Sachiko;Nishise Yuko;El-Shamy Ahmed;Lu Ling;Vallet Sophie;Matsuki Yohei;Hotta Hak;Adachi Tetuya;Deng Lin;Hotta Hak
• 通讯作者: Hotta Hak

HCV replication suppresses cellular glucose uptake through down-regulation of cell surface expression of glucose transporters

• DOI: 10.1016/j.jhep.2008.12.029
• 发表时间: 2009-05-01
• 期刊: JOURNAL OF HEPATOLOGY
• 影响因子: 25.7
• 作者: Kasai, Daisuke;Adachi, Tetsuya;Hotta, Hak
• 通讯作者: Hotta, Hak

C型肝炎ウイルスの持続感染は宿主細胞の核小体肥大、アポトーシス感受性低下及び細胞周期進行を誘導する

丙型肝炎病毒的持续感染会导致宿主细胞核仁肥大、细胞凋亡敏感性降低以及细胞周期进展。

• 发表时间: 2008
• 作者: Tetsutani K.;et.al.;足立昭夫;北山喜久美
• 通讯作者: 北山喜久美

C型肝炎ウイルス感染によるアポトーシスの分子機序の解析

丙型肝炎病毒感染诱导细胞凋亡的分子机制分析

• 发表时间: 2008
• 作者: Deng Lin;足達哲也;北山喜九美;分玉泰彰;北澤荘平;石戸総;勝二郁夫;堀田博
• 通讯作者: 堀田博

Sequence variation in the hepatitis C virus NS5A protein predicts clinical outcome of pegylated interferon/ribavirin combination therapy

丙型肝炎病毒 NS5A 蛋白的序列变异可预测聚乙二醇干扰素/利巴韦林联合治疗的临床结果

• 发表时间: 2008
• 期刊: Hepatology 48
• 作者: Ohtaki;et. al.;朝長ら;Bungyoku Yasuaki;Kasai Daisuke;Kim Soo Ryang;Inubushi Sachiko;EI-Shamy Ahmed
• 通讯作者: EI-Shamy Ahmed