無細胞合成システムを用いたウイルスタンパク質の翻訳後修飾に関わる宿主因子の同定

使用无细胞合成系统鉴定参与病毒蛋白翻译后修饰的宿主因子

• 批准号: 19041075
• 负责人: 山本 直樹
• 金额: $ 9.98万
• 依托单位: National Institute of Infectious Diseases
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 2008
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19041075/
• 关键词: 遺伝子; ウイルス; 感染症; 酵素; 蛋白質

HIVの粒子形成に関与する宿主因子を同定し、新規の治療標的を明らかにすることを目的とした。とりわけHIV-1 Gagタンパク質の機能的翻訳後修飾に関与する細胞側因子、特にキナーゼおよびユビキチンリガーゼの同定を行った。小麦胚芽無細胞タンパク質合成系により合成されたヒトキナーゼライブラリーおよびユビキチンリガーゼライブラリーを用いて、ウイルスタンパク質のリン酸化またはユビキチン化に関与する細胞側因子を、リン酸化部位結合酵素Pinlを分子プローブとしたハイスループット(HTP)アルファスクリーンにより決定した。またこれらの技術を用いてレトロウイルス構造タンパク質またはアクセサリータンパク質を翻訳後修飾するホスト因子の同定も合わせて行なった。発現クローニング法を含むさまざまな手法を用いて蛋白因子の同定につとめ、SOCS-1がHIV感染を亢進させること、atypical protein kinase C (PKCζ)がGagのp6のPTAP領域周辺をリン酸化し、宿主のESCRT系タンパク質との相互作用を制御することにより、ウイルスの粒子形成に必須の因子であること、SRPとそのキナーゼがHIV-1の複製に重要であることなどを報告した。さらにPinlとA20がIRF3活動を負に制御しRNAウイルスを抑制すること、などを見出した。一方、新しい阻害剤の開発研究では、低分子CXCR4アンタゴニストKRH-1636の誘導体の中から,より有望なKRH-2731を見出した。同定された因子については細胞レベルおよび個体レベルにおけるウイルス複製への役割や病原性発現機構との関連について検討し、宿主個体のHIV-1に対する応答機序制御機構の解明をめざすと共に同定された因子を標的とした阻害剤スクリーニングを行っている。

The formation of HIV particles is closely related to the host factor, and the new treatment target is the same as the target.とりわけHIV-1 The post-translational modification of the Gag's protein function is closely related to the cell side factor and the special glucocorticoid. Wheat germ cell-free fiber synthesis system, fiber synthesis systemよびユビキチンリガーゼライブラリーを is acidified with いて, ウイルスタンパク性のリンThe たはユビキチンに关 and the する cell side factor を, リン acidification site binding enzyme Pinlを moleculeプローブとしたハイスループット(HTP)アルファスクリーンによりDecisionした.またこれらのTechnologyを Use いてレトロウイルスConstruction タンパクquality またはアクセサリータンパク性を訳后modificationするホストfactorの同定も合わせて行なった.発成クローニング法をcontainingむさまざまな法を用いてprotein factorの同定につとめ, SOCS-1, HIV infection, hyperactivity, させること, atypical protein kinase C (PKCζ)がGagのp6のPTAP field peripheral acidificationし, hostのESCRT systemタンパクqualityとのinteractionをcontrolすることにより, ウイルスの particle formation is a necessary factor であること, SRP とそのキナーゼがHIV-1のreplication is important であることなどを report した.さらにPinlとA20がIRF3 activityをnegativeにcontrolしRNAウイルスをinhibitionすること、などを见出した. On the one hand, new research on the development of new inhibitors, low molecular weight CXCR4 KRH-1636 inducer, and KRH-2731 are expected. Same set of factors, cells, cells, individuals, cellsイルス copy への丫や pathogenic disease present organization とのrelated について検検し、dormitory Main individual HIV-1 code and response mechanism control mechanismに同定されたfactorをtargetedとした hinder スクリーニングを行っている.

项目成果

SOCS1 is an inducible host factor during HIV-1 infection and regulates the intracellular trafficking and stability of HIV-1 Gag

• DOI: 10.1073/pnas.0704831105
• 发表时间: 2008-01-08
• 期刊: PROCEEDINGS OF THE NATIONAL ACADEMY OF SCIENCES OF THE UNITED STATES OF AMERICA
• 影响因子: 11.1
• 作者: Ryo, Akihide;Tsurutan, Naomi;Yamamoto, Naoki
• 通讯作者: Yamamoto, Naoki

Ezrin, Radixin, and Moesin (ERM) proteins function as pleiotropic regulators of human immunodeficiency virus type 1 infection

• DOI: 10.1016/j.virol.2008.01.047
• 发表时间: 2008-05-25
• 期刊: VIROLOGY
• 影响因子: 3.7
• 作者: Kubo, Yoshinao;Yoshii, Hiroaki;Yamamoto, Naoki
• 通讯作者: Yamamoto, Naoki

A new humanized mouse model of Epstein-Barr virus infection that reproduces persistent infection, lymphoproliferative disorder, and cell-mediated and humoral immune responses

• DOI: 10.1086/590502
• 发表时间: 2008-09-01
• 期刊: JOURNAL OF INFECTIOUS DISEASES
• 影响因子: 6.4
• 作者: Yajima, Misako;Imadome, Ken-ichi;Fujiwara, Shigeyoshi
• 通讯作者: Fujiwara, Shigeyoshi

Cyclin K/CPR4 inhibits primate lentiviral replication by inactivating Tat/positive transcription elongation factor b-dependent long terminal repeat transcription.

Cyclin K/CPR4 通过灭活 Tat/正转录延伸因子 b 依赖的长末端重复转录来抑制灵长类慢病毒复制。

• 发表时间: 2008
• 期刊: AIDS. May 31;22(9)
• 作者: Urano E;Shimizu S; Futahashi Y;Hamatake M;Morikawa Y;Takahashi N;Fukazawa H;Yamamoto N;Komano J.
• 通讯作者: Komano J.

Low-intensity pulsed ultrasound activates the phosphatidylinositol 3 kinase/Akt pathway and stimulates the growth of chondrocytes in three-dimensional cultures: a basic science study.

• DOI: 10.1186/ar2451
• 发表时间: 2008
• 期刊: Arthritis research & therapy
• 影响因子: 4.9
• 作者: Takeuchi R;Ryo A;Komitsu N;Mikuni-Takagaki Y;Fukui A;Takagi Y;Shiraishi T;Morishita S;Yamazaki Y;Kumagai K;Aoki I;Saito T
• 通讯作者: Saito T