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抗がん剤が誘発する巨大DNA付加体の修復と致死効果

抗癌药物诱导的巨型DNA加合物的修复和致死作用

基本信息

批准号：
20012034
负责人：
井出博
金额：
$ 7.49万
依托单位：
Hiroshima University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2008
资助国家：
日本
起止时间：
2008 至 2009
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20012034/
关键词：
抗がん剤グノム損傷 DNA修復ゲノム損傷

项目摘要

多くの抗がん剤は,ゲノムに直接作用し損傷を与えるほか,DNA代謝酵素やDNA結合タンパクを不可逆的にゲノムにクロスリンクしがん細胞を死滅させる。この反応でゲノムに生じるDNA-タンパク質クロスリンク損傷(DPC)は,従来のbulky adductと比較し極めて巨大なDNA付加体である。細胞がもつDNA修復能力は,がん細胞の抗がん剤耐性を考える上で重要な因子であることから,本研究では,ヌクレオチド除去修復(NER)およびプロテアソームのDPC修復への関与を検討した。哺乳類のNERには約20種類のタンパク質が関与するが,サイズの大きいクロスリンクタンパク質(CLP)は立体障害により損傷部位におけるアッセンブリーを阻害し,NERが修復できるCLPサイズには上限があると予想される。この上限サイズを明らかにするため,サイズの異なるCLPを含むDNA基質を調製し,NER活性をin vitroで評価した。oxanineを含む150mer DNAを合成し,タンパク質とインキュベートすることにより,oxanine-タンパク質クロスリンクを含むDNA基質(150OXA-DPC)を調製した。150OXA-DPCを細胞粗抽出物とインキュベートし,生成物を変性PAGEで分析した。DNAの切断活性は,CLPサイズの増加とともに減少し,切断されるCLP上限サイズは8-10kDaであった。NERで除去されるCLPのサイズに上限があることが明らかとなったことから,NERに先行したプロテアソームによるCLP分解の可能性について検討した。DPC誘発剤で処理した細胞から,ゲノムを単離精製しCLPのポリユビキチン化をWestern法で検討した。プロテアソーム阻害剤の有無にかかわらず,CLPのポリユビキチン化シグナルは認められなかった。この結果から,プロテアソームによるCLP分解はNERに関与しないことが明らかとなった。

Multi-drug anti-virus, anti-virus, anti-tumor, anti I am sorry to hear that I am sorry that I have a DNA- problem. I am sorry to hear that you have to pay a lot of money for a lot of money. (DPC), I would like to know that there is a lot more money in bulky adduct than I do in DNA. The DNA repair ability, the tolerance test, the important factor, the NER, the DPC repair ability, the DPC repair ability, the tolerance test, the important factor, the tolerance test, the tolerance In mammalian NER, there are about 20 percent of the total number of animals and animals, and there are many problems in the treatment of breast cancer, such as breast cancer, breast cancer, breast cancer The upper limit is clear that the CLP contains the DNA gene, and the NER activity is the in vitro. Oxanine contains 150mer DNA synthesis, oxanine- synthesis contains DNA base (150OXA-DPC), and so on. The 150OXA-DPC extract was isolated from the cell, and the product was analyzed by PAGE analysis. DNA cut-off activity, CLP cut-off activity, CLP cut-off activity, cut-off CLP upper limit, cut-off activity, cut-off activity, cut-off activity, NER removes the possibility of CLP decomposition by removing the possibility of CLP decomposition in advance. DPC is required to improve the quality of the cell. The CLP is isolated from the cell. The Western method is used to improve the quality of the cell. Please tell me that there is something wrong with you, and that there is something wrong with you. CLP, you know, you have to know that you have a problem. The results show that you need to know that the CLP is decomposed into NER and that you are not aware of the data.