酸化的DNA障害を認識する高等真核生物由来の修復酵素
来自高等真核生物的修复酶可识别氧化 DNA 损伤
基本信息
- 批准号:10151233
- 负责人:
- 金额:$ 1.28万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
- 财政年份:1998
- 资助国家:日本
- 起止时间:1998 至 无数据
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
本研究では,酸化的損傷に対する塩基除去修復酵素hOGG1ならびにmNthl1の生化学的な酵素特性解析を行い,原核生物のホモログとの機能的な相違を検討した.1. 8-oxoGおよびme-Fapyを含むオリゴヌクレオチドを基質として,hOGG1およびFpgの両基質に対する活性と酵素パラメーターを調べた.8-oxoG,me-Fapyはともに両酵素の基質となることが示されたが,切断生成物は,hOGG1ではβ-脱離生成物であるのに対し,Fpgではβ,δ-脱離生成物であった.hOGG1の8-oxoGおよびme-Fapyに対するkcat,Kmは数倍程度異なったが,反応効率(kcat/Km)は同程度であった.Fpgでも同様な検討を行ったところ,hOGG1に比べ高いkcatが得られたが,基質特異性に関してはhOGG1と同様な結果が得られた.NaBH_4存在下,8-oxoGあるいはme-Fapyを含む基質とhOGG1,Fpgをインキュベートし,生成物をSDS-PAGEで分析した.その結果,両酵素で基質-酵素間のクロスリンク複合体の存在が確認された.これは,反応中間体として,酵素-基質間でSchiff baseが形成されることを示している.2. 様々な損傷を含むオリゴヌクレオチド基質を用いてmNthl1と大腸菌ホモローグ(EndoIII)の基質認識の差を検討した.TGの立体異性体(5S,6R体と5R,6S体)に対する活性は,両酵素の間で有為な差は認められなかった.また,EndoIIIではTGとURに対する活性は同程度であったが,DHTに対する活性は著しく低く,TGの約1/15であった.mNthl1でもTGとURに対する活性は同程度であったが,DHTでは低かった.しかし,DHTに対する活性はEndoIIIの場合ほどの大きな差はなく,TGの1/2程度であった.
This study で は, acidification of the damage に す seaborne る salt base to remove repair enzyme hOGG1 な ら び に mNthl1 の な enzyme properties of biochemistry analytic を い, prokaryotes の ホ モ ロ グ と の functionary な conceives を beg し 検 た. 1. 8 - oxoG お よ び me - Fapy を containing む オ リ ゴ ヌ ク レ オ チ ド を matrix と し て, hOGG1 お よ び Fpg の struck matrix に す seaborne る と enzyme active パ ラ メ ー タ ー を adjustable べ た. 8 - oxoG, me - Fapy は と も に の struck enzyme substrate と な る こ と が shown さ れ た が, cut off products は, hOGG1 で は Beta from products で あ る の に し seaborne, Fpg で は beta, and delta - from product で あ っ た. HOGG1 の 8 - oxoG お よ び me - Fapy に す seaborne る kcat, several times Km は degree different な っ た が, anti 応 sharper rate (kcat/Km) は with degree で あ っ た. Fpg で も with others な 検 line for を っ た と こ ろ, hO GG1 に higher than べ い kcat が have ら れ た が, substrate specificity に masato し て は hOGG1 と with others in the result of な が ら れ た. NaBH_4 presence, 8 - oxoG あ る い は me - Fapy を containing む matrix と hOGG1, Fpg を イ ン キ ュ ベ ー ト し, products を sds-page analysis で し た. そ の results , struck between enzyme で matrix - enzyme の ク ロ ス リ ン ク complex の exist が confirm さ れ た. こ れ は, anti 応 intermediates と し て, between enzyme and substrate で Schiff base が form さ れ る こ と を shown し て い る. 2. Others 々 な damage を containing む オ リ ゴ ヌ ク レ オ チ を ド matrix with い て mNthl1 と coliform ホ モ ロ ー グ (EndoIII) know の の matrix differential を beg し 検 た. TG の three-dimensional straight body (5 s, 6 r body と 5 r, 6 s) に す seaborne る active は, struck between enzyme の で for poor な は recognize め ら れ な か っ た. ま た, EndoII I で は TG と UR に す seaborne は る activity with degree で あ っ た が, DHT に す seaborne る active は the し く low く, TG の about 1/15 で あ っ た. MNthl1 で も TG と UR に す seaborne は る activity with degree で あ っ た が, DHT で は low か っ た. し か し, DHT に す seaborne る active は EndoIII の occasions ほ ど の is big Youdaoplaceholder0 な difference なく なく,TG 1/2 degree であった.
项目成果
期刊论文数量(2)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Terato H.: "Novel modification of 5-formyluracil by cysteine derivatives in aqueous solution." Nucleosides Nucleotides. 17. 131-141 (1998)
Terato H.:“水溶液中半胱氨酸衍生物对 5-甲酰尿嘧啶的新型修饰。”
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