ヒト癌のリスク評価に普遍的に関連するムチン抗原の遺伝子発現機構の解明

阐明与人类癌症风险评估普遍相关的粘蛋白抗原的基因表达机制

• 批准号: 20014022
• 负责人: 米澤 傑
• 金额: $ 9.47万
• 依托单位: Kagoshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2008
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2008 至 2009
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20014022/
• 关键词: ヒト癌; リスク評価; MUC1; MUC2; MUC4; MUC5AC; DNAメチル化; ヒストン修飾; 予後因子; DNAメチル化定量解析システム; クロマチン免疫沈降法

ヒト癌のリスク評価に関連して、これまで申請者らが明らかにしてきた予後不良因子のMUC1(汎膜結合ムチン)やMUC4(気道型膜結合ムチン)、予後良好因子であるMUC2(腸型分泌ムチン)の遺伝子発現機構に加え、膵胆管系の前癌性病変から広く発現して「早期マーカー」としての意義があるMUC5AC(胃表層型分泌ムチン)についてもその遺伝子発現機構を明らかにした。MUC5AC低発現細胞株において5-aza-2'-deoxycytidineとtrichostatin A処理を検討し、MUC5AC mRNAの発現回復を確認した後、様々な臓器由来のヒト癌細胞株についてDNAメチル化定量解析法(MassARRAY法)を用いてのメチル化解析を行った結果、MUC5ACプロモーター上流(約-3,700付近)のメチル化状態とMUC5AC mRNA発現状態に相関が確認された。更に、クロマチン免疫沈降法を用いたMUC5ACプロモーターにおけるヒストンH3-K9修飾状態の検討においても、MUC5ACプロモーター上流領域においてMUC5AC発現への関与が示唆された。これらの結果から、MUC5AC発現制御においてもDNAメチル化とヒストンH3-K9修飾の双方が影響している可能性が明らかとなった。MUC1の特定部位を鮮明に免疫染色することができる新規抗体(特許出願中)を開発し、この抗体により、これまで不十分であった種々の膵腫瘍における様々なタイプのMUC1の発現機序を解明できた。また、エピジェネティクスの分野において、従来までの検出限界5%を超える0.1%の感度を有する新規DNAメチル化検出法(特許出願中)を開発し、MUC1、MUC2、MUC4、MUC5ACの遺伝子発現過程におけるDNAメチル化のより詳細な解析を行えるようになった。

MUC1 and MUC4 are the adverse factors for cancer screening and evaluation.(Pathway-type membrane-binding protein), future good factors such as MUC2 (intestinal secreting protein) and gene development mechanism, and the significance of MUC5AC (gastric surface secreting protein) in the development of early stage carcinogenesis of biliary tract. After MUC5AC low-expression cell line was examined by 5-aza-2'-deoxycytidine and trichostatin A treatment, MUC5AC mRNA expression recovery was confirmed, and the results of quantitative analysis of MUC5AC mRNA expression by MassARRAY method were analyzed. Correlation between MUC5AC up-stream (approximately-3,700) and MUC5AC mRNA expression status was confirmed. In addition, MUC5AC can be used in immuno-precipitation method to detect the state of H3-K9 modification, MUC5AC can be used in upstream domain to detect MUC5AC development. As a result, MUC5AC appears to have a positive effect on both DNA and H3-K9 modifications. A new antibody (licensed) was developed for specific sites of MUC1 by immunostaining, and the mechanism of MUC1 development was elucidated. The detection limit of MUC1, MUC2, MUC4 and MUC5AC is 5% to 0.1% and the sensitivity of MUC1, MUC2, MUC4 and MUC5AC is more than 0.1%.

项目成果

ムチンからみた腫瘍進展プロセス

从粘蛋白看肿瘤进展过程

• 发表时间: 2009
• 期刊: 肝胆膵 58
• 作者: 米澤傑;他
• 通讯作者: 他

Clinicopathologic significance of expression profiles of MUC1, MUC2 and MUC4 mucins in human neoplasms and their epigenetic expression mechanism

人类肿瘤中MUC1、MUC2和MUC4粘蛋白表达谱的临床病理意义及其表观遗传表达机制

• 发表时间: 2008
• 作者: Yonezawa;S.;et.al.
• 通讯作者: et.al.

Beta 1,3-galactosyltransferases-4/5 are novel tumor markers forgynecological cancers

Beta 1,3-半乳糖基转移酶-4/5 是妇科癌症的新型肿瘤标志物

• 发表时间: 2009
• 期刊: Tumor Biology 30(1)
• 作者: Seko;A.;et.al.
• 通讯作者: et.al.

MUC1 expression is regulated by DNA methylation and histone H3 lysine 9 modification in cancer cells

• DOI: 10.1158/0008-5472.can-07-6844
• 发表时间: 2008-04-15
• 期刊: CANCER RESEARCH
• 影响因子: 11.2
• 作者: Yamada, Norishige;Nishida, Yukari;Yonezawa, Suguru
• 通讯作者: Yonezawa, Suguru

Immunohistochemical study of mucin expression in periampullary adenomyoma

• DOI: 10.1007/s00534-009-0176-5
• 发表时间: 2010-05-01
• 期刊: JOURNAL OF HEPATO-BILIARY-PANCREATIC SCIENCES
• 影响因子: 3
• 作者: Higashi, Michiyo;Goto, Masamichi;Yonezawa, Suguru
• 通讯作者: Yonezawa, Suguru