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細胞膜足場形成の多次元複合体の構造生物学

細胞膜足場形成の多次元複合体の構造生物学
形成细胞膜支架的多维复合物的结构生物学
批准号：
20051017
负责人：
箱嶋 敏雄
金额：
$3.97万
依托单位：
Nara Institute of Science and Technology
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2008
资助国家：
日本
项目状态：
已结题
起止时间：
2008 至 2009
来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20051017/
关键词：
タンパク質複合体足場形成細胞骨格接着分子

项目摘要

项目成果

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本年度は,Tiam1/STEFとCD44, PAR3, JIP2との複合体の調製と基礎実験わ重点的に推進した.CD44の細胞質ドメインとPAR3の結合領域は、大腸菌でGST-融合タンパク質として調製して,プルダウンアッセイやBIAcoreを用いた結合実験により結合に必要な最小領域を決定した.その結果,酸性残基に富む領域が結合部位と判明した.アミノ酸配列の特徴から,CD44やephrin B1,1,3あるいはNMDA受容体等のmotif-I, PAR3やJIP2等のmotif-IIとの分類した.前年度に構造決定したTiam1/STEFのPHCCExドメインには塩基性残基が密集した溝がある.これらを含んだ保存された塩基性残基(ArgとLys)にAla変異を導入して,CD44, PAR3, JIP2との結合への影響を調べた.その結果,結合部位をCCサブドメインとExサブドメインからなる塩基性の溝と同定した.motif-Iとmotif-IIの両者ともこの溝に結合することもわかった.更に,上記の相互作用が細胞レベルでも重要であるかどうかを,変異Tiam1を用いて解析した.その結果,結合部位での変異が細胞膜の葉状仮足の誘導へ大きく影響することがわかり,細胞レベルでも上記の相互作用が重要であることが証明できた.以上のデータをまとめて,EMBO Journalに論文発表した.また,これと平行して,植物ホルモン受容体の構造研究を推進して,ジベレリン受容体によるジベレリン認識と標的タンパク質認識に関しての構造的知見を更に深めるために,合成アゴニストとの相互作用の解析を行った.
期刊论文(36)
专著(0)
科研奖励(0)
会议论文
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发表时间： 2009
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DOI： 10.1007/s10822-008-9214-7
发表时间： 2008-04
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作者： [K. Gohda;T. Hakoshima]
通讯作者： K. Gohda;T. Hakoshima
共 33 条
    癌細胞の浸潤・転移関連RacGEFと細胞接着分子の構造生物学
    • 批准号：
      20011006
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
    • 资助金额：
      $6.34万
    • 财政年份：
      2008
    • 负责人：
      箱嶋 敏雄
    • 依托单位：
      Nara Institute of Science and Technology
    微小管ダイナミックス制御の構造的基礎
    • 批准号：
      19037017
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
    • 资助金额：
      $3.84万
    • 财政年份：
      2007
    • 负责人：
      箱嶋 敏雄
    • 依托单位：
      Nara Institute of Science and Technology
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    • 批准号：
      19036014
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
    • 资助金额：
      $3.9万
    • 财政年份：
      2007
    • 负责人：
      箱嶋 敏雄
    • 依托单位：
      Nara Institute of Science and Technology
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    • 批准号：
      12147206
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
    • 资助金额：
      $32.9万
    • 财政年份：
      2000
    • 负责人：
      箱嶋 敏雄
    • 依托单位：
      Nara Institute of Science and Technology
    海外基金