膜貫通型プロテアーゼの細胞骨格への連結の構造的基礎

连接跨膜蛋白酶与细胞骨架的结构基础

• 批准号: 19036014
• 负责人: 箱嶋 敏雄
• 金额: $ 3.9万
• 依托单位: Nara Institute of Science and Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 2008
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19036014/
• 关键词: NEP; ERM; 膜タンパク質; アダプタータンパク質; シグナル伝達

精製した組み替え型radixinのFERMドメイン(残基1-310)と一回膜貫通型I型膜タンパク質プロテアーゼMT1-MMP(membrane-typel 1 matrix metalloproteinase)の細胞質テールの合成ペプチド(20残基)との複合体を, 結晶化ロボット(HYDRA-II)を用いることで, 結晶化に成功した(a=b=122.7, c=128.3Å, P6_122、非対称単位に1複合体).SPring-8での放射光実験により, 2.4ÅのX線強度データを収集した. その後, 通常のMR法により位相決定して, 最終的にR_<work>=0.252/R_<free>=0.292までCNSとREFMACを用いて構造の精密化を行った.得られたFERM-MT1-MMP複合体結晶中では, ペプチドの両親媒性領域は、FERMドメインのサブドメインAのβ2A-鎖と反平行β-β相互作用をしており, 疎水性残基がサブドメインAのくぼみにはまり込んでいた. この相互作用は, サブドメインCに結合する従来のICAM-2やCD44などの膜タンパク質と全く異なるものであった. この新事実は, ERMタンパク質が, FERMドメインを介して, MT1-MMPに結合するとともに, その基質である接着分子CD44とも結合できることを示唆している.上記の研究結果を踏まえ, 現在, 論文を作成中であり, 学術雑誌に投稿予定である.

重组放射素的纯化FERM结构域（残基1-310）与单跨膜型1基质金属蛋白酶（MT1-MMP）的胞质尾部与细胞质尾部的复合物成功地使用结晶化机器人（hydra-ii）（A = b = 122.7，c = 122.7，c = 122.7，c = 122.7，c = 122.7，c = 122.7，c = 122.7，c = 122.7，c = 122.7，c = 128.3。非对称单位）。通过同步加速器辐射实验在春季-8中收集2.4Å的X射线强度数据。之后，通过常规MR方法确定阶段。最后，使用CNS和REFMAC对结构进行了完善，直到R_ <工作> = 0.252/r_ <free> = 0.292。在由此产生的FERM-MT1-MMP复合物晶体中，肽的两亲性区域与FERM结构域的亚域A的β2A链具有反平行的β-β相互作用ERM蛋白可以通过FERM结构域与MT1-MMP结合，也可以与粘附分子CD44结合，即底物。根据上述研究的结果，目前正在创建一篇论文，并将提交给学术期刊。

项目成果

RacGEF Tiam1/2の新規なタンパク質標的認識ドメインの構造

RacGEF Tiam1/2 新型蛋白质靶标识别结构域的结构

• 发表时间: 2008
• 作者: Machida;R.J.;Y.Hashiguchi;M.Nishida;S.Nishida.;河村正二;村上 聡;箱嶋敏雄
• 通讯作者: 箱嶋敏雄

P-loop pliability of Rho-kinase for inhibitor binding.

Rho 激酶对抑制剂结合的 P 环柔韧性。

• 发表时间: 2007
• 期刊: P-loop pliability of Rho-kinase for inhibitor binding. in Drug Design Research Perspectives, Nova Science Publishers, Inc.
• 作者: Gohda;K.
• 通讯作者: K.

構造解析に基づくRhoキナーゼ阻害剤の開発

基于结构分析的Rho激酶抑制剂的开发

• 发表时间: 2009
• 期刊: 実験医学2009年3月増刊号「分子標的薬開発への挑戦」 27
• 作者: 久保田大地;林伸彦;石田武和;合田圭吾
• 通讯作者: 合田圭吾

Structural basis for neutral endopeptidas 24.11 recognition by ERM proteins

ERM 蛋白识别中性内肽 24.11 的结构基础

• 发表时间: 2008
• 作者: 藤博幸;根本航;伊藤隆;古川貴章;由縣ゆり子;A. Naito;Toshio Hakoshima
• 通讯作者: Toshio Hakoshima

Structure of a novel membrane-targeting domain found in Rac GEF Tiam1/2

Rac GEF Tiam1/2 中发现的新型膜靶向结构域的结构

• 发表时间: 2009
• 作者: Mukai;Y.;et.al.;Toshio Hakoshima
• 通讯作者: Toshio Hakoshima