3種類の胃プロトンポンプトランスポートソームの機能と環境基盤の解明

阐明三种胃质子泵转运体的功能和环境基础

基本信息

  • 批准号:
    20056010
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 4.61万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
  • 财政年份:
    2008
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2008 至 2009
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

本研究では、胃酸分泌細胞アピカル膜(分泌膜)の胃プロトンポンプ(H^+,K^+-ATPase)の調節機構における、脂質環境とK^+-Cl^-共輸送体(KCC4)の役割について検討した。ブタ胃粘膜からアピカル膜に富むベシクル(SAV)を調製し、SAVを界面活性剤のCHAPSで処理することにより、脂質ラフトに対応するdetergent-resistant membranes(DRM)画分と、非ラフトに対応するnon-DRM画分を単離した。SAVの胃プロトンポンプ活性はmethyl-β-cyclodextrin (MβCD)処理による脂質ラフトの破壊で顕著に減少し、水溶性コレステロールの添加によるラフトの再構築で元のレベルにまで回復した。SAVにおいて、H^+,K^+-ATPaseはDRMとnon-DRMの両方の画分に分布している一方、H^+,K^+-ATPaseと分子会合しCl^-輸送に関与しているKCC4は、DRMにのみ分布していた。MβCD処理後、H^+,K^+-ATPaseはDRMにおいて観察されなくなり、non-DRMにのみ分布した。一方、KCC4の分布はMβCD処理により影響を受けなかった。H^+,K^+-ATPaseとKCC4を安定共発現させたHEK293細胞においても、H^+,K^+-ATPaseはDRMとnon-DRMの両方に分布する一方、KCC4はDRMのみに分布した。またMβCD処理後の分布パターンもSAVの場合と同様であった。H^+,K^+-ATPase-KCC4共発現細胞のH^+,K^+-ATPase由来プロトン輸送活性は、MβCD処理により顕著に減少し、水溶性コレステロールの添加にょり回復した。以上のことから、アピカル膜の脂質ラフトに存在する胃プロトンポンプは、異なるラフトに存在するKCC4と連関し、アップレギュレーションされているものと考えられた。
This study で は, gastric acid secretion cell ア ピ カ ル membrane secretion (film) の stomach プ ロ ト ン ポ ン プ (^ ^ H +, K + ATPase) の regulator に お け る, lipid environment と K + Cl ^ - ^ a total conveying body (KCC4) cut に の service つ い て beg し 検 た. ブ タ gastric mucosa か ら ア ピ カ ル film に rich む ベ シ ク ル (SAV) を し modulation, SAV を interface active tonic の CHAPS で 処 Richard す る こ と に よ り, lipids ラ フ ト に 応 seaborne す る detergent - resistant membranes(DRM) are divided into と, non-ラ フトに against 応する, and non-DRM are divided into を単 away from た. SAV の stomach プ ロ ト ン ポ ン プ active は methyl - beta - cyclodextrin (M beta CD) 処 Richard に よ る lipid ラ フ ト の broken 壊 で 顕 に reduce し, water-soluble コ レ ス テ ロ ー ル の add に よ る ラ フ ト の to construct で yuan の レ ベ ル に ま で reply し た. SAV に お い て, H ^ + K ^ + - ATPase は DRM と non - DRM の struck party の draw points に distribution し て い る side, H ^ + K ^ + - ATPase と molecules meet し Cl ^ - conveying に masato and し て い る KCC4 は, DRM に の み distribution し て い た. M after the beta CD 処 and H ^ +, K ^ + - ATPase は DRM に お い て 観 examine さ れ な く な り, non - DRM に の み distribution し た. One side, the <s:1> distribution of KCC4 によ MβCD processing によ によ influence を is けな った った. ^ ^ H +, K + ATPase と KCC4 を stability were 発 now さ せ た HEK293 cells に お い て も, H ^ + K ^ + - ATPase は DRM と non - DRM の struck party に distribution す る side, KCC4 は DRM の み に distribution し た. After processing またMβCD, the <s:1> distribution is パタ and <s:1> と と SAV <s:1> situations are と the same as であった. ^ ^ H +, K + ATPase - KCC4 発 の H ^ + cells, total K ^ + - ATPase origin プ ロ ト ン は transport activity, M beta CD 処 に よ り 顕 に reduce し, water-soluble コ レ ス テ ロ ー ル の add に ょ り reply し た. Above の こ と か ら, ア ピ カ の ル membrane lipid ラ フ ト に exist す る stomach プ ロ ト ン ポ ン プ は, different な る ラ フ ト に exist す る KCC4 と even masato し, ア ッ プ レ ギ ュ レ ー シ ョ ン さ れ て い る も の と exam え ら れ た.

项目成果

期刊论文数量(35)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Aquaporin-5-mediated cancer cell differentiation in human gastric adenocarcinoma
水通道蛋白 5 介导的人胃腺癌癌细胞分化
  • DOI:
  • 发表时间:
    2009
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    A. Yoshikawa;et al.;Takashi Iida;酒井秀紀
  • 通讯作者:
    酒井秀紀
Gastric proton pump activity is regulated by K^+-Cl^- cotransporter-4 in the apical canalicular membrane of parietal cells
胃质子泵活性由壁细胞顶小管膜中的 K^-Cl^- 协同转运蛋白-4 调节
  • DOI:
  • 发表时间:
    2009
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    A. Yoshikawa;et al.;Takashi Iida;酒井秀紀;飯田崇史;富沢直也;吉河朗;富沢真也;藤井拓人;吉河朗;初田真知子;藤田恭輔;富沢真也;藤井拓人
  • 通讯作者:
    藤井拓人
Functional Association between K+-Cl- Cotransporter-4 and H+,K+-ATPase in the Apical Canalicular Membrane of Gastric Parietal Cells
  • DOI:
    10.1074/jbc.m806562200
  • 发表时间:
    2009-01-02
  • 期刊:
  • 影响因子:
    4.8
  • 作者:
    Fujii, Takuto;Takahashi, Yuji;Sakai, Hideki
  • 通讯作者:
    Sakai, Hideki
胃壁細胞アピカル膜の酸分泌機構の分子生理
胃壁细胞顶膜泌酸机制的分子生理学
  • DOI:
  • 发表时间:
    2009
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    A. Yoshikawa;et al.;Takashi Iida;酒井秀紀;飯田崇史;富沢直也;吉河朗;富沢真也;藤井拓人;吉河朗;初田真知子;藤田恭輔;富沢真也;藤井拓人;藤井拓人
  • 通讯作者:
    藤井拓人
酸分泌休止時と刺激時における胃プロトンポンプの性質
休息和刺激酸分泌时胃质子泵的特性
  • DOI:
  • 发表时间:
    2009
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    A. Yoshikawa;et al.;Takashi Iida;酒井秀紀;飯田崇史;富沢直也;吉河朗;富沢真也;藤井拓人;吉河朗;初田真知子;藤田恭輔;富沢真也;藤井拓人;藤井拓人;富沢真也;藤田恭輔
  • 通讯作者:
    藤田恭輔
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  • 通讯作者:
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  • DOI:
  • 发表时间:
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  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    清水 貴浩;川島健太郎;藤井 拓人;酒井 秀紀
  • 通讯作者:
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  • DOI:
  • 发表时间:
    2007
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    K;Hosoya;A. Makihara;Y;Ohshima;K;Katayama;M;Tomi;M;Tachikawa;酒井 秀紀;K. Fujita
  • 通讯作者:
    K. Fujita
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  • DOI:
  • 发表时间:
    2007
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    Kobayashi S.;et. al.;酒井 秀紀;Asano S. et al.;Fujii T. et al.;Sakai H. et al.;Tabuchi Y. et al.;Tabuchi Y. et al.;酒井 秀紀;森井 孫俊;酒井 秀紀;藤井 拓人;高橋 佑司;高橋 佑司;藤井 拓人;山内 理嗣
  • 通讯作者:
    山内 理嗣
Molecular basis of voltage-dependent inactivation of TRPP3 channels
TRPP3 通道电压依赖性失活的分子基础
  • DOI:
  • 发表时间:
    2014
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    樋口 大河;清水 貴浩;藤井 拓人;Nilius Bernd;酒井 秀紀
  • 通讯作者:
    酒井 秀紀

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