病態ラット肝細胞の細胞容積調節機構の異常に関与する塩素イオンチャネル

氯离子通道参与病理大鼠肝细胞细胞体积调节机制异常

• 批准号: 06770027
• 负责人: 酒井 秀紀
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Toyama Medical and Pharmaceutical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06770027/
• 关键词: パッチクランプ法; ラット; 肝細胞; 細胞容積調節機構; イオンチャネル; アラキドン酸

本研究では、病態ラット(遺伝性高ビリルビン尿症ラット)単離肝細胞の細胞容積調節機構に関与するイオンチャネルの異常を電気生理学的手法のパッチクランプ法を用いて検討することを当初の目的とした。低浸透圧負荷を与えた場合に活性化される塩素イオンチャネル(Cl^-チャネル)電流は、病態ラットの方が有意に小さかった。しかし、調節性収縮(RVD)機構は、病態ラットの場合も正常に機能していたため、目的を変更し、正常ラット肝細胞のCl^-チャネルの調節機構についての研究を行い、以下のような興味深い新知見を得た。1.多くの細胞では、低浸透圧負荷を与えると、RVD機構が働く。これは、初めにK^+チャネルが開き、それに続きCl^-チャネルが開くことになる。しかし、肝細胞の場合、最初に活性化されるのは、Cl^-チャネルであり、K^+チャネルの寄与はほとんどなかった。このCl^-チャネルは外向き整流作用を示し、チャネルブロッカーのSITSにより阻害された。2.低浸透圧負荷によって活性化されるCI^-チャネルの活動は、アラキドン酸によって顕著に抑制された。また、アラキドン酸代謝酵素阻害剤によっても有意に抑制された。したがってアラキドン酸それ自体が作用しているものと考えられた。3.単離肝細胞のRVDの様子をビデオに撮り、細胞容積の時間的変化を検討した。アラキドン酸は、RVD機構には影響を及ぼさなかったが、低張負荷直後の細胞膨張を有意に抑制した。この結果から、アラキドン酸はCl^-チャネルを直接阻害するのではなく、細胞外からの水の流入を阻害することにより間接的にCl^-チャネルの活動を抑制しているものと考えられた(細胞膨張の程度が、Cl^-チャネルの活動を調節している)。このようなアラキドン酸の調節機構の発見はこれが初めてである。

这项研究的最初目的是使用电生理贴剂夹法调查与分离的肝细胞（遗传性高胆红素大鼠）的细胞体积调节机制（遗传性高胆红素大鼠）的异常。在低渗透载荷下，活化的氯离子通道（CL^ - 通道）电流在病理大鼠中显着降低。但是，由于在病理大鼠的情况下，由于调节性收缩（RVD）机制正常起作用，因此进行了目标，并且进行了正常大鼠肝细胞中Cl^通道的调节机制，并获得了以下有趣的新发现。 1。在许多细胞中，低渗透负荷会导致RVD机制起作用。这将首先打开K^+通道，然后是Cl^ - 通道。但是，在肝细胞的情况下，第一个被激活的是Cl^ - 通道，而K^+通道几乎没有贡献。该Cl^ - 通道表现出向外的整流效果，并被通道阻滞剂的位置抑制。 2。通过低渗透载荷激活的CI^ - 通道的活性被花生四烯酸显着抑制。蛛网膜酸代谢酶抑制剂也显着抑制了它。因此，人们认为花生四烯酸本身在起作用。 3。在视频中记录了孤立的肝细胞的RVD，并检查了细胞体积的时间变化。蛛网膜酸对RVD机制没有影响，但在低音载荷后立即抑制了细胞肿胀。从这些结果中可以认为，蛛网膜酸通过抑制从细胞外部的水流涌入CL^ - 通道的活性，而不是直接抑制CL^通道的活性（细胞膨胀程度调节Cl^-Channel的活性）。这是第一次发现蛛网膜酸的调节机制。