病態ラット肝細胞の細胞容積調節機構の異常に関与する塩素イオンチャネル

氯离子通道参与病理大鼠肝细胞细胞体积调节机制异常

• 批准号: 06770027
• 负责人: 酒井 秀紀
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Toyama Medical and Pharmaceutical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06770027/
• 关键词: パッチクランプ法; ラット; 肝細胞; 細胞容積調節機構; イオンチャネル; アラキドン酸

本研究では、病態ラット(遺伝性高ビリルビン尿症ラット)単離肝細胞の細胞容積調節機構に関与するイオンチャネルの異常を電気生理学的手法のパッチクランプ法を用いて検討することを当初の目的とした。低浸透圧負荷を与えた場合に活性化される塩素イオンチャネル(Cl^-チャネル)電流は、病態ラットの方が有意に小さかった。しかし、調節性収縮(RVD)機構は、病態ラットの場合も正常に機能していたため、目的を変更し、正常ラット肝細胞のCl^-チャネルの調節機構についての研究を行い、以下のような興味深い新知見を得た。1.多くの細胞では、低浸透圧負荷を与えると、RVD機構が働く。これは、初めにK^+チャネルが開き、それに続きCl^-チャネルが開くことになる。しかし、肝細胞の場合、最初に活性化されるのは、Cl^-チャネルであり、K^+チャネルの寄与はほとんどなかった。このCl^-チャネルは外向き整流作用を示し、チャネルブロッカーのSITSにより阻害された。2.低浸透圧負荷によって活性化されるCI^-チャネルの活動は、アラキドン酸によって顕著に抑制された。また、アラキドン酸代謝酵素阻害剤によっても有意に抑制された。したがってアラキドン酸それ自体が作用しているものと考えられた。3.単離肝細胞のRVDの様子をビデオに撮り、細胞容積の時間的変化を検討した。アラキドン酸は、RVD機構には影響を及ぼさなかったが、低張負荷直後の細胞膨張を有意に抑制した。この結果から、アラキドン酸はCl^-チャネルを直接阻害するのではなく、細胞外からの水の流入を阻害することにより間接的にCl^-チャネルの活動を抑制しているものと考えられた(細胞膨張の程度が、Cl^-チャネルの活動を調節している)。このようなアラキドン酸の調節機構の発見はこれが初めてである。

This study examines the relationship between the cell volume regulating mechanism of isolated hepatocytes and pathological hyperuricemia. The technique of オンチャネルのAbnormal electrophysiology is the original purpose of the method. Low saturation pressure load and activating される塩素イオンチャネル(Cl^-チャネル) current は, sick ラットのsquare が intentional ささかった for the occasion.しかし、Accommodative contraction (RVD) mechanism は、Sick ラットのoccasion もNormal function していたため、Purpose を変change し、NormalラットLiver cell のCl^-チャネルの regulatory mechanism についての research を line い, the following のような interesting and interesting い new knowledge を got た. 1. Multi-cell structure, low osmotic pressure load and structure, and RVD mechanism structure.これは、开めにK^+チャネルが开き、それに続きCl^-チャネルが开くことになる.しかし, the case of liver cells, the initial activation of されるのは, Cl^-チャネルであり, K^+チャネルの发 and はほとんどなかった.このCl^-チャネルはExternal rectification effectをshowし、チャネルブロッカーのSITSにより hinderingされた. 2. Low saturation pressure load activates the active ingredient CI^-チャネルのActivity, and inhibits the action of the acidic acid.また, アラキドン acid metabolism enzyme inhibitor によっても intentionally inhibits された.したがってアラキドン acid それAUTO が Effect しているものと卡えられた. 3. The method of RVD of single isolated hepatocytes and the change of cell volume over time are as follows. There is no influence on the RVD mechanism due to acidic acid, and it does not intentionally inhibit cell expansion after hypotonic load.このRESULTSから、アラキドン acidはCl^-チャネルをDirect obstructionするのではなく, extracellular からの水の inflow obstruction することにより indirect The にCl^-チャネルのactivity をinhibition しているものとKaoえられた (the degree of cell expansion が, Cl^-チャネルのactivity をregulation している).このようなアラキドン草の発见はこれが初めてである.