病態ラット肝細胞の細胞容積調節機構の異常に関与する塩素イオンチャネル

氯离子通道参与病理大鼠肝细胞细胞体积调节机制异常

• 批准号: 06770027
• 负责人: 酒井 秀紀
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Toyama Medical and Pharmaceutical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06770027/
• 关键词: パッチクランプ法; ラット; 肝細胞; 細胞容積調節機構; イオンチャネル; アラキドン酸

本研究では、病態ラット(遺伝性高ビリルビン尿症ラット)単離肝細胞の細胞容積調節機構に関与するイオンチャネルの異常を電気生理学的手法のパッチクランプ法を用いて検討することを当初の目的とした。低浸透圧負荷を与えた場合に活性化される塩素イオンチャネル(Cl^-チャネル)電流は、病態ラットの方が有意に小さかった。しかし、調節性収縮(RVD)機構は、病態ラットの場合も正常に機能していたため、目的を変更し、正常ラット肝細胞のCl^-チャネルの調節機構についての研究を行い、以下のような興味深い新知見を得た。1.多くの細胞では、低浸透圧負荷を与えると、RVD機構が働く。これは、初めにK^+チャネルが開き、それに続きCl^-チャネルが開くことになる。しかし、肝細胞の場合、最初に活性化されるのは、Cl^-チャネルであり、K^+チャネルの寄与はほとんどなかった。このCl^-チャネルは外向き整流作用を示し、チャネルブロッカーのSITSにより阻害された。2.低浸透圧負荷によって活性化されるCI^-チャネルの活動は、アラキドン酸によって顕著に抑制された。また、アラキドン酸代謝酵素阻害剤によっても有意に抑制された。したがってアラキドン酸それ自体が作用しているものと考えられた。3.単離肝細胞のRVDの様子をビデオに撮り、細胞容積の時間的変化を検討した。アラキドン酸は、RVD機構には影響を及ぼさなかったが、低張負荷直後の細胞膨張を有意に抑制した。この結果から、アラキドン酸はCl^-チャネルを直接阻害するのではなく、細胞外からの水の流入を阻害することにより間接的にCl^-チャネルの活動を抑制しているものと考えられた(細胞膨張の程度が、Cl^-チャネルの活動を調節している)。このようなアラキドン酸の調節機構の発見はこれが初めてである。

The purpose of this study is to investigate the mechanism of cell volume regulation in isolated hepatocytes by using the method of electrophysiology to detect abnormal cell volume regulation. Low saturation voltage load and low saturation voltage conditions are activated by the activation of the active phase (Cl^-2) and the activation of the active phase. The regulatory mechanism of liver cells in healthy and abnormal conditions is studied. The following new insights are obtained. 1. Multi-cell, low saturation load, RVD mechanismこれは、初めにK^+チャネルが开き、それに続きCl^-チャネルが开くことになる。In the case of liver cells, the initial activation of the liver cells, Cl^- The Cl-O-C process is a process of outward rectification, and the Cl-O-C process is a process of inhibition. 2. Low penetration load, low activation, low activation. The enzyme inhibitor of acid metabolism is intentionally inhibited by the enzyme inhibitor. The first step is to improve the quality of the product. 3. The analysis of RVD of isolated hepatocytes and the change of cell volume in time are discussed. The effects of acid and RVD on cell expansion after hypotonic loading were intentionally suppressed. The results are as follows: direct inhibition of Cl^-generation by acid, inhibition of extracellular water inflow, and indirect inhibition of Cl^-generation by acid (regulation of cell expansion and Cl^-generation). The adjustment mechanism of the acid in the first stage of development