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抗体固定化磁性細菌粒子による抗原の認識および分離

抗体固定化磁性细菌颗粒的抗原识别和分离

基本信息

批准号：
63604525
负责人：
松永是
金额：
$ 0.96万
依托单位：
Tokyo University of Agriculture and Technology
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1988
资助国家：
日本
起止时间：
1988 至 1989
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-63604525/
关键词：
走磁性細菌磁気微粒子抗体固定化抗原抗体反応磁気誘導

项目摘要

走磁性細菌は、マグネタイト微粒子を常温・常圧の非常に温和な条件下で合成する。この磁気微粒子は粒子径約1000〓で単磁区構造を取り、周囲は一様に有機薄膜によって覆われている。このため、金属の溶出が起こりにくく、分散性にも優れている。すでに、申請者らはこの磁気微粒子に酵素の固定化を行い、同サイズの人工マグネタイトに比べ酵素の固定化量も多く、酵素活性が高いことを示した。この有機薄膜に覆われた磁気微粒子に抗体を結合することにより、磁気誘導可能な分離・認識機能を有するハイブリッド材料を設計することができる。本研究は新しいハイブリッド材料としての抗体固定化磁気微粒子の作製を目的として、昭和63年度は走磁性細菌の大量培養および磁気微粒子の分離、磁気微粒子を覆う有機薄膜のキャブクタリゼーション、抗体固定化磁気微粒子の調製と固定化条件の検討などについて行った。走磁性細菌は炭素源にコハク酸、窒素源に硝酸ナトリウム、鉄源にキナ酸鉄を含むMSGM培地で培養したところ、培養開始から5日後で定常に達し、細胞数は2×10^8cells/mlまで増殖した。超音波処理により抽出した磁気微粒子は非常に分散性に優れており、平均粒子径は0.12μmであった。さらにこの磁気微粒子を有機溶媒で処理すると膜の存在は認められなかった。そこで、膜の脂質について分析したところ、3種のりん脂質と3種の糖脂質が検出された。また、膜の脂肪酸組成を分析したところ、その90%が不飽和脂肪酸であった。超音波破砕により抽出した磁気微粒子にグルタルアルデヒド処理を行った後、FITC結合抗マウスIgG抵抗体を固定化した。磁性細菌粒子には263μg/mg particlesの抗体が固定化でき、この量は比較に用いた人工のマグネタイトの約4倍であった。さらに、今後はこの抗体固定化磁性細菌粒子を磁気作用と組み合わせて利用することで、簡便、迅速ながんマーカーたんぱくの検出やがん細胞の分離のための基礎研究を行う。

Magnetic bacteria can synthesize particles at room temperature, normal pressure and very mild conditions. These magnetic particles have a particle diameter of about 1000. The structure of the magnetic field is selected, and the organic thin film is coated. The metal is dissolved and dispersed. The amount of immobilized enzyme and enzyme activity of the applicant are higher than those of the immobilized enzyme. These organic thin films are coated with magnetic particles and antibody binding, magnetic induction, separation, recognition, and material design. The purpose of this study is to study the preparation of antibody-immobilized magnetic particles on new materials and materials. In Showa 63, the mass culture of magnetic bacteria, the separation of magnetic particles, the coating of magnetic particles on organic films, and the modulation and immobilization conditions of antibody-immobilized magnetic particles were studied. Magnetic bacteria were cultured in MSGM medium with carbon source, nitric acid source, iron source, and iron source. After 5 days of culture, the number of cells reached 2× 10^8 cells/ml. Ultrasonic treatment of magnetic particles is very good dispersion, average particle diameter is 0.12μm The existence of magnetic particles in organic solvents is recognized. 3 kinds of lipids and 3 kinds of glycolipids were analyzed. The fatty acid composition of the membrane was analyzed. After ultrasonic extraction of magnetic particles, FITC conjugated anti-IgG antibodies were immobilized The amount of antibody immobilized on magnetic bacterial particles was 263μg/mg, which was about 4 times higher than that of artificial particles. In the future, basic research on the magnetic interaction and assembly of antibody immobilized magnetic bacterial particles will be carried out.