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西洋ワサビのペルオキシダーゼアイソザイムの遺伝子構造と発現調節

辣根过氧化物酶同工酶的基因结构及表达调控

基本信息

批准号：
63622508
负责人：
新名惇彦
金额：
$ 0.7万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1988
资助国家：
日本
起止时间：
1988 至 1989
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-63622508/
关键词：
西洋ワサビペルオキシダーゼ cDNA ゲノム遺伝子組織特異的発現

项目摘要

西洋ワサビ培養細胞からmRNAを調整し、puc9に連結したcDNAバンクを作成した。Welinderの報告した中性ペルオキシダーゼCのアミノ酸配列に基づき合成したプローブを用い、バンクから3種のペルオキシダーゼcDNA、prxc1a、c1b、c1cを得た。塩基配列は互いに約90%の相同性を有し、prxc1aはWelinderの報告したアミノ酸配列と完全に一致するペプチドおよび、N末端、C末端に翻訳後プロセッシングを受けるたしい余分のペプチドをコードしていた。培養細胞のゲノムDNAのバンクからcDNA、prxc1aをプローブにしてcDNAに対応する3個、およびprxc2、prxc3と名付けた計5個の遺伝子を単離した。prxc1cゲノム遺伝子の一部を除き全塩基配列を決定した。いずれも4エキソンと3イントロンから成り、347-353アミノ酸残基をコードしていた。イントロンがエキソンを分断する位置は全て同じであった。コード領域の相同性はC1群とC2とは71-76%、C1群とC3は63-67%であった。補欠分子、ヘムに統合するHis^<40>とHis^<170>近傍の約25残基は既報のカブ、タバコのペルオキシダーゼも含め、全ての酵素で殆ど同じであった。いずれの遺伝子も5'側上流にはTATAボックスが3'側下流にはポリ(A)シグナルが数か所存在し、機能性遺伝子であることが推定された。そこで培養細胞、植物体各組織からRNAを調整し、ノザンハイブリダイゼーションを行った。プローブとして遺伝子間で比較的相同性の低い領域、prxc1群ではcDNA、prxc2とc3では第4エキソン領域を用いた。培養細胞ではprxc1、c2、c3いずれのmRNAも多く認められた。根部でも3種のmRNAが存在したが、茎部、葉部ではprxc1mRNAのみが認められた

The expression of mRNA and puc9 in cultured cells was modified. Welder's report is neutral, and three kinds of cDNA, prxc1a, c1b, and c1c, are obtained. The base alignment is approximately 90% identical to each other, and prxc1a is completely identical to the base alignment reported by Welder. In cultured cells, there were 3 cDNA fragments, prxc1a, prxc2, prxc3, and 5 cDNA fragments. prxc1c is a part of the list of candidates, except for the list of candidates. The 4-amino-3-amino-4-amino-4-amino-3-amino-4-amino-5-amino-4-amino-4-amino-5-amino-4-amino-5-amino-6-amino-5-amino-5-amino-6-amino-5-amino-5-amino-5 The location of the site is the same. The similarity of C1 group to C2 group is 71-76%, C1 group to C3 group is 63-67%. About <40><170>25 residues in the vicinity of the complement molecule, the protein, and the enzyme are almost identical. The 5'side upstream of the gene is TATA, the 3' side downstream is TATA, and the 3'side downstream of the gene is TATA. The RNA of cultured cells and plant tissues is regulated and the RNA of cultured cells is regulated. The low domain of similarity between the two groups, prxc1 group, prxc2 group, prxc3 group, and prxc4 group are used. In cultured cells, prxc1, c2 and c3 are expressed in mRNA. Three kinds of mRNA exist in roots, stems and leaves.