細胞性粘菌における細胞骨格制御のポストゲノム解析

盘基网柄菌细胞骨架调控的后基因组分析

• 批准号: 15013211
• 负责人: 足立 博之
• 金额: $ 4.48万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15013211/
• 关键词: 細胞性粘菌; 細胞骨格; 細胞運動; 細胞質分裂; 貧食作用; ポストゲノム解析; 低分子量GTPase

細胞性粘菌は生育、分化の各ステージで多様な細胞運動(広義の細胞運動:細胞質分裂、細胞移動、貧食作用、飲作用など細胞形態変化を伴う細胞機能やその前提となる細胞基質間接着、細胞間接着なども含めて考える)を示し、半数体で変異株が使える、タギング法や標的遺伝子破壊など正逆遺伝学的手法に優れるなどの利点から高等動物の細胞運動の最も有力なモデル真核微生物である。本研究は、完了間近のゲノムプロジェクト及び筑波大漆原秀子先生らによるESTプロジェクトの配列情報を利用し、上述の広義細胞運動の制御に関わる細胞性粘菌の低分子量GTPase、特にRhoファミリーGTPaseとその制御分子(RhoGDI, RhoGAP, RhoGEF)、さらにエフェクター分子(IQGAPなど)を網羅的に同定し、どの分子が細胞質分裂、どれが貧食作用といった細胞内機能のカタログ化、さらに各機能のシグナルカスケードの解明を目指している。昨年度までにRhoファミリーGTPase自身、RhoGDI、エフェクターIQGAPについて、分子の同定とクローニング、細胞内局在の決定、遺伝子破壊株の解析、酵母two-hybridd法の網羅的相互作用解析によるシグナルカスケードの解明を行ってきた。今年度は、RhoファミリーGTPaseの新機能と考えられた細胞内膜輸送の解析のため、細胞性粘菌のゴルジ体及び小胞体マーカーを作製した上で、これらを利用して昨年度解析を開始したRhoGAP、RhoGEFのうちRhoGAP1のゴルジ体と小胞体への局在を証明した。これまでに明らかになっていたRacH、RacIに加え、RacLのゴルジ体局在も明らかになり、RhoファミリーGTPaseの膜輸送への関与が示唆された。また、細胞性粘菌の全15種のRhoファミリーGTPaseすべてについて、CA型1種、DN型2種の変異体をGFPをN末端に融合して高発現させ、増殖期における細胞内局在と発現細胞の表現型を野生型の場合と比較した。その結果、CA型の場合、細胞内局在は野生型と変わらないが生育が悪くなるものが見られ、DN型の場合、生育その他表現型は変わらないが局在が変化するものが見られることがわかった。

The growth and differentiation of myxomycetes spp. multiple cell movements (cell movement: cell division, cell movement, feeding, action, cell morphology, cell cycle, cell cycle, cell cycle This is the most powerful method for the detection of eukaryotic microorganisms. In this study, we have completed a series of experiments on the preparation of low molecular weight GTPase (RhoGDI, RhoGAP), low molecular weight myxomycetes, low molecular weight GTPase, and special molecular weight molecules (RhoGDI, RhoGAP). RhoGEF), the homology of the IQGAP molecule network, the cell division of the molecular cell, the activation of the intracellular mechanism of the molecule, the mechanism of the cell, and the mechanism of the target. Last year, we tested GTPase itself, RhoGDI, IQGAP genes, molecular markers, intracellular decisions, cell breakage analysis, yeast two-hybridd interaction analysis, cell cycle analysis, and yeast interaction analysis. This year, the new GTPase system is used to determine the transport of intracellular membrane, cytomyxomycetes and small cell bodies, and the use of yesterday's annual analysis of RhoGAP, Rho, RhoGAP1, and so on. Please tell me that the RacH, RacI, RacL, and Sports Bureau are very sensitive to the information, Rho, and GTPase films. All 15-year-old Rho and cytopathic myxomycetes were infected with GTPase, 1 CA and 2 DN strains, the N-terminal fusion of GFP was highly detectable, and the wild type was detected in the cytomegaly table. The results of the results, the CA type, the intracellular situation of the wild type, the wild type, the DN type, the wild type, the wild

项目成果

Kosodo et al.: "Cooperation of Slyl/SM-family protein and sec18/NSF of Saccharomyces cerevisiae in disassembly of cis-SNARE membrane-protein complexes"Biosci.Biotechnol.Biochem.. 67. 448-450 (2003)

Kosodo 等人：“酿酒酵母的 Slyl/SM 家族蛋白和 sec18/NSF 在顺式 SNARE 膜蛋白复合物的分解中的合作”Biosci.Biotechnol.Biochem.. 67. 448-450 (2003)

Tomishige et al.: "Mutations that are synthetically lethal with a gas1Delta allele cause defects in the cell wall of Saccharomyces cerevisiae"Mol.Genet.Genomics. 269. 562-573 (2003)

Tomishige 等人：“gas1Delta 等位基因的综合致死突变会导致酿酒酵母细胞壁缺陷”Mol.Genet.Genomics。