細胞性粘菌における細胞骨格制御のポストゲノム解析

盘基网柄菌细胞骨架调控的后基因组分析

• 批准号: 14014207
• 负责人: 足立 博之
• 金额: $ 3.71万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14014207/
• 关键词: 細胞性粘菌; 細胞骨格; 細胞運動; 細胞質分裂; 貪食作用; ポストゲノム解析; 低分子量GTPase

細胞性粘菌は生育、分化の各ステージで多様な細胞運動(広義の細胞運動:細胞質分裂、細胞移動、貪食作用、飲作用など細胞形態変化を伴う細胞機能やその前提となる細胞基質間接着、細胞間接着なども含めて考える)を示し、半数体で変異株が使える、タギング法や標的遺伝子破壊など正逆遺伝学的手法に優れるなどの利点から高等動物の細胞運動の最も有力なモデル真核微生物である。本研究は、完了間近のゲノムプロジェクト及び筑波大田中可昌先生らによるESTプロジェクトの配列情報を利用し、上述の広義細胞運動の制御に関わる細胞性粘菌の低分子量GTPase、特にRhoファミリーGTPaseとその制御分子(RhoGDI, RhoGAP, RhoGEF)、さらにエフェクター分子(IQGAPなど)を網羅的に同定し、どの分子が細胞質分裂、どれが貪食作用といった細胞内機能のカタログ化、さらに各機能のシグナルカスケードの解明を目指している。昨年度までにRhoファミリーGTPase自身、RhoGDI、エフェクターIQGAPについて、分子の同定とクローニング、細胞内局在の決定、遺伝子破壊株の解析、酵母two-hybrid法の網羅的相互作用解析によるシグナルカスケードの解明を行った。今年度は、それぞれ少なくとも30種はあるRhoGAPとRhoGEFの解析に着手した。GAPとしてRhoGAP1、GEFとしてミオシンMyoMの尾部にあるGEFドメインを選び、全15種のRhoファミリーGTPaseの野生型、CA型、DN型とのtwo-hybrid相互作用を検討したところ、唯一RhoGAP1とRacF2のCA型との間に特異的相互作用が検出された。これにより、変異型利用の有効性が確認され、網羅的相互作用解析の系が確立した。さらに、RacF2-RhoGAP1系が、生育に必須であり、ゴルジ体に局在して小胞輸送に関わる可能性のあることもわかった。今後、確立した上述の系を用い、すべてのGAPとGEFについて解析を行う。

Cellular slime mold, growth and differentiation, various functions, cell movement (広义, cell movement: cytoplasmic division, cell movement, gluttony, drinking effect, cell morphology change, accompanying cell function, cell function, cell-matrix indirect connection, cell-indirect connection The なども汉めて卡える)をshowし, the half-body で変different strain が使える, and the タギング法や名的缝子波壊など正verse The technique of genetics is the most powerful and effective method of cell movement in higher animals and eukaryotic microorganisms. The purpose of this study is to use the distribution information of Mr. Tsukuba Ohta Nakamasa and Tsukuba Ota Nakamasa after the completion of this study. RhoGDI, a low molecular weight GTPase that controls cell movement, and a special GTPase that regulates cellular slime mold. RhoGAP, RhoGEF), さらにエフェクターmolecule (IQGAP など)を同定し, どのmolecule がcytoplasmic division, どれがbulimia effect and といったintracellular function のカタログ化, さらにeach function のシグナルカスケードの解明を Eye finger している. Last year's GTPase itself, RhoGDI, IQGAP IQGAP, Molecule's same setting, and fine Determination of intracellular localization, analysis of residual strains and strains, and interaction analysis of yeast two-hybrid method. This year, the analysis of 30 kinds of RhoGAP and RhoGEF is done. GAPとしてRhoGAP1, GEFとしてミオシンMyoMのtailにあるGEFドメインを选び, a total of 15 kinds of RhoファミリーGTPase wild type, CA type, DN type, two-hybrid interaction, and unique interaction between RhoGAP1 and RacF2.これにより, confirmation of the effectiveness of the abnormal utilization, and establishment of the relationship of the interaction analysis of the net.さらに, RacF2-RhoGAP1 line が, fertility に であり, ゴルジ Body bureau is in して cell transport に switch わる possibility のあることもわかった. From now on, we will establish the use of the above-mentioned system and the analysis and execution of GEF analysis.

项目成果

Kosodo et al.: "Binding of sly1 to Sed5 enhances formation of the yeast early Golgi SNARE complex"J.Cell Sci.. 115. 3683-3691 (2002)

Kosodo 等人：“sly1 与 Sed5 的结合增强了酵母早期高尔基 SNARE 复合体的形成”J.Cell Sci.. 115. 3683-3691 (2002)

Imai et al.: "A Rho GDP-dissociation linhibitor is involved in cytokinesis of Dictyostelium"Biochem.Biophys.Res.Commun.. 296. 305-312 (2002)

Imai 等人：“Rho GDP 解离抑制剂参与盘基网柄菌的胞质分裂”Biochem.Biophys.Res.Commun.. 296. 305-312 (2002)

Hashimoto et al.: "Progression of the stacked Golgi compartments in the yeast Saccharomyces cerevisiae by overproduction of GDP-mannose transporter"Yeast. 19. 1413-1424 (2002)

Hashimoto 等人：“由于 GDP-甘露糖转运蛋白的过量生产，导致酿酒酵母中堆积的高尔基体区室的进展”酵母。