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細胞性粘菌を用いた細胞質分裂シグナルの解明

使用盘基网柄菌阐明胞质分裂信号

基本信息

批准号：
11760056
负责人：
足立博之
金额：
$ 1.41万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至 2000
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-11760056/
关键词：
細胞性粘菌細胞質分裂シグナル伝達 RasGAP IQGAP RhoファミリーGTPase

项目摘要

細胞質分裂は、細胞分裂の最後に細胞質が二分される段階であるが、等価な娘細胞を複製するために、時間的・空間的に厳密に制御されている。本研究は、細胞質分裂の分子細胞生物学的研究に有利な細胞性粘菌を用い、細胞質分裂の制御に関わるタンパク質の同定と機能解析を目的としている。平成13年度は、まず、細胞性粘菌のESTプロジェクトから見いだした新規RasGAPであるGAPCについて、全長クローニングと配列決定をしたうえで、細胞内での高発現により懸濁培養時に多核化することを明らかにした。GAPCはRasGAPのなかでもGAP1ファミリーに属し、リン脂質特にIP4との結合が予想される。既に示されたように、細胞性粘菌でRasGの遺伝子破壊をすると同様に多核化することから、GAPCはRasGのGAPとして働くことで細胞質分裂に関わるものと考えられた。また、細胞質分裂に関わるタンパク質間の相互作用を解析する目的で酵母細胞質内での相互作用を解析可能なcytotrap two hybridシステムを検討した。細胞質分裂に関わるIQGAP様タンパク質GAPAをbeitとして検索した結果、GAPAと融合しているSOSタンパク質とライブラリーの中に豊富にあるRasGとの間に結合が起こり、そのバックグラウンドでスクリーニングが困難になっていることが判明し、現在のところこの方法ではGAPA結合タンパク質は見いだされていない。現在RasG欠損株からcDNAライブラリーを作り直してスクリーニングに向けて準備中である。

Cell division, cell division, final cell division, cell division and cell division. In this study, the study of molecular biology of cell division is beneficial to the system of cell division of myxomycetes. In 13 years of Pingcheng, the EST cells of Myxobacteria spp., Cellular Myxomycetes spp., Cellular Myxobacteria spp., Pingcheng, Pingcheng, GAPC, RasGAP, GAP1, IP4, IP4, fat, fat and fat. The results showed that the cells were divided into two groups: RasG, cellular slime mold, cellular slime mold, cellular myxomycetes, cellular slime molds, cellular myxomycetes, cellular myxomycetes, cellular slime molds, cellular myxomycetes, cellular slime molds, cellular slime molds, cellular myxomycetes, cellular slime molds, cellular myxomyxomycetes, cellular myxomyxomycetes Analysis of the interaction between yeast cells and cells. Objective to analyze the interaction between yeast cells and yeast cells. It is possible to analyze the interaction between cytotrap two hybrid cells. The results of cell division, IQGAP, beit, GAPA fusion, SOS, RasG, and so on, the results, the results. Now, we need to use the GAPA method in combination with each other. Please do not know what to do. At present, RasG is in the process of preparing for a direct response to the current situation that RasG is in the process of preparing for the first time.