細胞質分裂及び細胞基質間接着のシグナルに関わる蛋白質の構造と機能

参与胞质分裂和细胞-基质粘附信号的蛋白质的结构和功能

• 批准号: 10179204
• 负责人: 足立 博之
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10179204/
• 关键词: 細胞質分裂; 細胞基質間接着; シグナル伝達

本研究では,細胞の秩序だった形態変化とその制御のシグナル伝達を解析するためのモデル系として細胞性粘菌を用い,特に,細胞質分裂及び細胞基質間接着について,シグナル伝達に関わる分子群を同定し,個々の機能及び分子間相互作用の解析を行った上で,最終的には,組換え体タンパク質の発現精製を経てシグナル分子複合体の構造解析を目指している。今年度は,初年度として,個々の分子の同定、機能解析,発現系の構築を中心に研究を進めた。細胞質分裂シグナルに関わるIQGAP様タンパク質GAPAについては,GFP融合タンパク質を用いた細胞内動態の解析から、GAPAが細胞質分裂時に分裂溝に集積することを明らかにした。また,変異GAPAの実験から,GAPAとGAP-related domainで結合する未知タンパク質は、細胞質分裂には必須だが,GAPAの分裂溝集積には必須ではないこと,ミオシンの欠損株を用いた実験から,ミオシンもGAPAの分裂溝集積には必須でないことを明らかにした。一方,低分子量GTPaseのRac1AとRac1Bについて大腸菌での発現・精製系を構築し,GAPAとの弱い結合を明らかにした。また,GAPAの発現・精製系に関しては,大腸菌系では量・質ともに不十分であると判明し,バキュロウイルス-Sf9細胞系の検討に着手した。細胞質分裂に関わるCykAタンパク質に関しては,欠損株の解析から細胞質分裂の終結に関わること,進化上保存されたタンパク質であることを明らかにし,ホモログ分子のクローニングと配列決定を行った。また、大腸菌系による発現を検討中である。細胞基質間接着に関しては、タギング法で得た6株の変異株からタグに隣接した領域のクローニングと部分配列の決定を行ない,そのうちいくつかで,はっきりとしたopen reading frameを見いだした。現在全長cDNAのクローニング中である。

In this study, cell order, cell order, cell morphology, cell order, cell structure, cell division and cell base were analyzed, and the molecular population was identified, the interaction between two cells was analyzed, and the interaction between two cells was analyzed. The molecular complex was analyzed and analyzed by tissue analysis. In this year's and the beginning of this year's conference, the same level of research and analysis is available at the beginning of the year, and the center is responsible for the improvement of research. The cell splitters, the IQGAP cells, the GAPA cells, the GFP fusion cells, the GAPA cells, the cells. For example, if you do not know what to do, then if you do not know what to do, then you will need to know that you are not allowed to do so. If you do not know what to do, you need to know that you are not allowed to do so. If you do not know what to do, you must be able to do so. If you do not know how to do so, you must be aware that GAPA GAPA is not valid. If you are not aware of it, you must be aware of it. If you are not aware of it, you must have it. On the one hand, low molecular weight GTPase, Rac1A, Rac1B, low molecular weight, high molecular weight, low molecular weight, low molecular The results of GAPA test show that the strain of large bacteria is not very high, and that the cell line of large bacteria is not very clear. The cell line of Sf9 is very sensitive. Cell division is sensitive to cell division, CykA cell division, cell division and cell division. The pathogens and bacteria of Dazhong have been found to be in the middle of the disease. The cell base was connected to each other, and the cell culture method was used to obtain the results of the determination of the cell cycle, the cell base, the cell, the cell, the cell. At present, the full-length cDNA is in the middle of the competition.