機能性ミニチュアRNAタンパク質複合体の構築

功能性微型RNA-蛋白质复合物的构建

• 批准号: 15030220
• 负责人: 森井 孝
• 金额: $ 1.54万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15030220/
• 关键词: RNA-タンパク質複合体; タンパク質デザイン; ライブラリー; in vitroセレクション; リセプター; ファージ・ディスプレイ

ATPと結合するRNA分子(アプタマー)はすでに報告されているが、RNAライブラリーによって多様化したリボヌクレオペプチド・ライブラリーから作成したリボヌクレオペプチドリセプターは、引き続きペプチドサブユニットを最適化することで、これまで報告されているATP結合性RNAアプタマーおよび先に得られたATP結合性リボヌクレオペプチドを超越した基質選択性を有するリボヌクレオペプチドリセプターの創製が期待される。このために、基質結合場近傍に位置すると考えられるペプチドサブユニットのN末端にランダムな7残基からなるペプチドループを導入したペプチドライブラリーをファージディスプレイ法を用いて作製し、先に得られたATP結合性リボヌクレオペプチドのRNAサブユニットと複合体を形成させることにより、ペプチドサブユニットに多様な構造をもつリボヌクレオペプチド・ライブラリーを作製した。このライブラリーを用いて、ATPとdATPを高度に識別するリボヌクレオペプチドリセプターを得た。もとのATP結合性リボヌクレオペプチドはATPとdATPを識別できないため、ペプチドサブユニットN末端に存在する7アミノ酸がこの分子認識に関与していると考えられる。この成果は論文に投稿準備中である。ここに述べた「RNAを多様化したライブラリー」と「ペプチドを多様化したライブラリー」を連続して用いるリボヌクレオペプチドリセプター法により、リボヌクレオペプチドに「高い基質選択性」と「化学反応性」を段階的に付与してテーラーメイド人工酵素を作製する方法論の基盤が確立できたと考えられる

ATP is bound to RNA molecules (アプタマー)はすでにreportsされているが、RNAライブラリーによって多様化したしたリボヌクレオペプチドリセプターは, 出き続きペプチドサブユニットをOptimization することで, これまで report されているATP-binding RNA アプタマーおよびFirst られたATP binding Synthetic materialsるリボヌクレオペプチドリセプターのcreationがLooking forward to される.このために、Matrix binding field close to the position すると卡えられるペプチドサブユニットのN-terminal にランダムな7 Residue からなるペプチドループを Import したペプチドライブラリーをファージディスプレイ法を用いてし、The first ATP-binding リボヌクレオペプチドのRNAサブユニットと complex was formed by させることにより、ペプチドサブユニットに多様なstructuralをもつリボヌクレオペプチド・ライブラリーを Manufacturer.このライブラリーを Use いて, ATPとdATPを高に to identify するリボヌクレオペプチドリセプターを得た.もとのATP binding リボヌクレオペプチドはATPとdATPをidentificationできないため、ペプチThe existence of the N-terminal of the ドサブユニトに7アミノ acid がこのmolecule recognition and the していると考えられる. The result of this paper is in preparation for submission.ここに说べた「RNAを多様化したライブラリー」と「RNAを多様化したライブラリー」を连続して用いるリボヌクレオペプチドリセプター法により,リボヌクレオペプチドに "High matrix selectivity" and "chemical reactivity" are provided in stagesしてテーラーメイドArtificial Enzyme を Production する Methodology のbase が Established できたとtest えられる

项目成果

T.Morii: "Novel real time sensors to quantitatively assess in vivo inositol 1,4,5-trisphosphate production in intact cells"Chem.Biol.. 11(in press). (2004)

T.Morii：“定量评估完整细胞体内肌醇 1,4,5-三磷酸产量的新型实时传感器”Chem.Biol.. 11（印刷中）。

T.Morii: "Functional Reassembly of a Split Ph Domain"J.Am.Chem.Soc.. 124. 5000-5004 (2003)

T.Morii：“分裂 Ph 结构域的功能重组”J.Am.Chem.Soc.. 124. 5000-5004 (2003)

T.Morii: "Regulatory interaction of sodium channel IQ-motif with calmodulin C-terminal lobe"Riochem.Biophys.Res.Commun.. 307. 290-296 (2003)

T.Morii：“钠通道 IQ-基序与钙调蛋白 C 末端叶的调节相互作用”Riochem.Biophys.Res.Commun.. 307. 290-296 (2003)

T.Morii: "Ribonucleopeptide : functional RNA-peptide complexes."Biopolymers. 76. 66-68 (2004)

T.Morii：“核糖核酸肽：功能性 RNA-肽复合物。”生物聚合物。

T.Morii: "Amplification of receptor signalling by Ca^<2+> entry-mediated translocation and activation of PLCγ2 in B lymphocytes"EMBO J.. 22. 4667-4688 (2003)

T. Morii：“B淋巴细胞中Ca ^ 2+ 进入介导的易位和PLCγ2激活对受体信号的放大”EMBO J.. 22. 4667-4688 (2003)