機能性ミニチュアRNAタンパク質複合体の構築

功能性微型RNA-蛋白质复合物的构建

• 批准号: 14035226
• 负责人: 森井 孝
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14035226/
• 关键词: タンパク質デザイン; RNA-タンパク質複合体; ライブラリー; in vitroセレクション; リセプター; ファージ・ディスプレイ

本年度の研究ではRNA・ペプチドサブユニット間、およびサブユニット・基質間の相互作用様式を基質の結合に協同的に働くように設計したRNA・ペプチドサブユニットから形成される機能性RNA・ペプチド複合体の設計と構築を行った。リボヌクレオペプチド・リセプターはRNAをライブラリー化することによる機能化と、ペプチドサブユニットをライブラリー化することによる機能化の二つの機能化方法を同時または順次適用することが出来る。今回、ペプチドライブラリーを新たに作製してリボヌクレオペプチド・ライブラリーを作成し、ATP結合性リボヌクレオペプチド・リセプターのATP選択性を向上させることを目的とした。RevペプチドのN末端にランダム化した7アミノ酸を導入し、ファージディスプレイを作製した。7アミノ酸領域はS-S結合を形成することによりλファージのtail capsidに発現され、ループ構造をとることができる。このファージとRNAとの複合体を用いて、ATP/AMP選択性を上げることを指標にしてスクリーニングを行った。Revペプチドを用いたリボヌクレオペプチド・ライブラリーのin vitro selectionから得られたRNA配列(UCUCGU-GUGUA-UGGGG-UA-UG-CU-GCGUUGG)を用いた場合、ランダムアミノ酸配列はFTPRDADに代表される類似配列が得られた。これらを用いたリボヌクレオペプチド複合体のATP結合活性はRevペプチドからなるリボヌクレオペプチド複合体と同等のものであったが、AMPに対する選択性およびdATPに対する選択性ははるかに高いものであった。この結果から、ペプチド・ライブラリーを用いることにより、リボヌクレオペプチド・リセプターの高機能化が行えることが明らかになった。

This year, we have conducted a study on the interaction between RNA and wireless devices. This year, we have conducted a study on the interaction between two systems. This year, we have conducted a study on the interaction between computers and databases. This year, we have conducted a study on the interaction between computers and the interaction between computers. This year, we have studied the interaction between computers and the interaction between computers. This year, we have conducted a study on the interaction between computers and the interaction between computers. This year, we have studied the interaction between computers and the interaction between computers. This year, we have studied the interaction between computers and the interaction between computers. This year, we have studied the interaction between computers and the interaction between computers. This year, we have studied the interaction between computers and the interaction between computers. This year, we have studied the interaction between computers and the interaction between computers. This year, we have studied the interaction between computers, the interaction between computers, the interaction Do you want to know if you are going to be able to use the RNA to improve the performance of your computer? you need to make sure that you can use the two-way mechanism to make sure that you are using the same method. This time, you need to make sure that you can improve your performance. This time, you will be able to improve the performance of the ATP. This time, you will be able to select the ATP option to improve the performance of the system. Rev

项目成果

T.Morii: "Functional Reassembly of a Split PH Domain"J. Am. Chem. Soc.. 124(in press). (2003)

T.Morii：“拆分 PH 结构域的功能重组”J。

T.Morii: "In Vitro Selection of ATP-binding Receptors Using a Ribonucleopeptide Complex"J. Am. Chem. Soc.. 124. 4617-4622 (2002)

T.Morii：“使用核糖核酸肽复合物体外选择 ATP 结合受体”J。

T.Morii: "A New Fluorescent Biosensor for Inositol Trisphosphate"J. Am. Chem. Soc.. 124. 1139-1140 (2002)

T.Morii：“一种新型肌醇三磷酸荧光生物传感器”J。

T.Morii: "Chemical Approach to Untangle the Sequence-Specific DNA Binding by Proteins"Chem-Eur. J.. 22. 5067-5071 (2002)

T.Morii：“解开蛋白质序列特异性 DNA 结合的化学方法”Chem-Eur。

T.Morii: "A General Strategy to Determine a Target DNA Sequence of Short Peptide : Application to a D-Peptide"J. Am. Chem. Soc.. 124. 180-181 (2002)

T.Morii：“确定短肽目标 DNA 序列的一般策略：在 D 肽中的应用”J。