Aufklärung von molekularen Mechanismen der Thrombozytenregulation durch 2-D-Gelelektrophorese und ESI-MS / MALDI-TOF-MS

使用 2-D 凝胶电泳和 ESI-MS / MALDI-TOF-MS 阐明血小板调节的分子机制

• 批准号: 5160482
• 负责人: Professorin Dr. Elke Butt-Dörje
• 金额: --
• 依托单位: Institut für Experimentelle Biomedizin, Lehrstuhl II
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 1998-12-31 至 2003-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/5160482?language=en
• 关键词: Aufkl; rung; von; molekularen; Mechanismen

Die intrazellulären Signalwege der durch NO/cGMP aktivierten cGMP-abhängigen Proteinkinase (cGK) in humanen Plättchen, die zu einer Inhibierung der Thrombozytenaggregation führen, sind nur zum Teil bekannt. Das Ziel unserer geplanten Arbeiten ist die Identifizierung neuer in vivo Substrate der cGK, die die Mechanismen der Thrombozytenhemmung zu verstehen helfen - speziell die Inaktivierung des Proteinkinase C Signalweges. Geplant ist die radioaktive Markierung der Thrombozyten in vivo mit anschließender zweidimensionaler Auftrennung des Proteingemisches und nachfolgender Identifizierung einzelner radioaktiv markierter Proteine durch nano-Elektrospray-Massenspektrometrie und Mikrosequenzierung. Dabei werden die erhaltenen Daten mit Protein- und Nukleotidsequenzdatenbanken abgeglichen oder können zur Synthese von Oligonukleotidprimern für eine anschließende Klonierung benutzt werden.

NO/cGMP激活人血小板cGMP-结合蛋白激酶（cGK）的细胞内信号通路，对血小板聚集的抑制作用，仅限于体外。本研究主要是鉴定cGK的体内新底物，研究血栓形成的机制，以帮助研究蛋白激酶C信号通路的特异性。Geplant是通过纳米电喷雾质谱和微测序技术，在体内对血栓素进行放射性标记，并通过蛋白质发射和性别鉴定进行放射性标记。Dabei韦尔登die erhaltenen Daten mit Protein- und Nukleotidsequenzdatenbanken abgeglichen oder können zur Synthese von Oligonukleotidprimern für eine anschließe Klonierung benutzt韦尔登。