Intrazellulärer und extrazellulärer Abbau von Polyestern

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Die Untersuchungen zum Abbau von Polyestern durch extrazelluläre Enzyme werden fortgesetzt, und der intrazelluläre Abbau von PHB wird neu in die Untersuchungen aufgenommen. Ziele bezüglich des extrazellulären Abbaus sind (i) Aufklärung der Regulation der PHB-Depolymerase-Expression in Pseudomonas lemoignei durch Charakterisierung des Repressors PhaR und weiterer regulatorischer Proteine, (ii) Analyse von Struktur-Funktionsbeziehungen einer PHB-Depolymerase und einer Poly(3-hydroxyoktanoat)-Depolymerase durch biochemische Charaktersierung von Mutanten- und Hybrid-Depolymerasen, (iii) Aufklärung der Struktur der Substratbindedomäne einer PHB-Depolymerase und (iv) Bestimmung des Potentials von Polyester-Depolymerasen zur enantiomerselektiven Estersynthese in wasserfreien Lösungsmitteln. Ziele bezüglich des intrazellulären Abbaus von PHB sind (i) erstmalige Charakterisierung einer intrazellulären PHB-Depolymerase mit besonderer Berücksichtigung der Unterschiede zu extrazellulären Depolymerasen und (ii) Charakterisierung und Funktionsaufklärung eines hitzestabilen, für die intrazelluläre Mobilisation von PHB essentiellen Faktors ('Aktivator'). Die Untersuchungen schließen elektronenmikroskopische und immunologische Untersuchungen mit ein.