In vitro Untersuchungen zur Aufnahme organischer Fremdstoffe in die Zellpopulationen des Haarfollikels mittels Zellkulturen

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Ziele des geplanten Vorhaben sind: - Mit dem inzwischen aufgebauten Co-Kultursystem (Keratinozyten-Melanozyten-Modell) soll die Fremdstoffaufnahme in die Zellpopulationen der Haarwurzel unter definierten Bedingungen mit Modellsubstanzen forensisch relevanter Stoffklassen untersucht werden. - Es sollen Einflußparameter wie Proteinbindung, Lipophilie (Oktanol/H2O-Verteilungskoeffizient), pka, Stereoselektivität etc. für die Aufnahme in die Keratinozyten und in die Melanozyten getrennt sowie in Co-Kultur untersucht werden. - Anhand von Extraktionsexperimenten an fremdstoffhaltigen Keratinozyten sollen vergleichende Aussagen über den Grad bzw. die Stärke der jeweiligen Bindung an zelluläre Komponenten getroffen werden. - In Langzeitversuchen soll die Fremdstoffexposition der in der Haarwurzel ortsständigen Melanozyten bei chronischem Konsum simuliert werden. Es sollen vergleichende Aussagen über die Akkumulation an Melanin bzw. der Melaninassoziation während der Melanogenese getroffen werden. - In Co-Kulturexperimenten soll ein Transfer von fremdstoffbeladenen Melaningranula in die Keratinozyten erfolgen. - Anhand der Zunahme des Fremdstoffgehaltes pigmenthaltiger Keratinozyten gegenüber nichtpigmenthaltigen Keratinozyten soll für die Testsubstanzen eine graduelle Abschätzung des Einflusses der Pigmentierung für ein Haaranalysenergebnis erfolgen. - Es sollen mögliche Auswirkungen kompetitiver Effekte bei gleichzeitiger Anwesenheit mehrerer Fremdstoffe in vitro untersucht werden. Diesem Expositionsszenario kommt in den Zellen der Haarwurzel große praktische Bedeutung bei polytoxikomanen Personen zu. - Es soll ein Primärkultursystem aufgebaut werden. - Es sollen Pilotexperimente mit Keratinozyten zum Aufbau eines Zellkultursystems erfolgen, dessen Zellen in vitro keratinisieren, so daß Vorgänge bei der Keratinisierung und das Schicksal von Fremdstoffen während der Keratinisierung später direkt untersucht werden können.