Überexpression von Interferon tau (IFN-tau) in in vitro produzierten Rinderembryonen

体外产生的牛胚胎中干扰素 tau (IFN-tau) 的过度表达

• 批准号: 5195902
• 负责人: Professor Dr. Karl Schellander
• 金额: --
• 依托单位: Abteilung Tierzucht und Tierhaltung
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 1998-12-31 至 2001-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/5195902?language=en
• 关键词: berexpression; von; Interferon; tau; IFN

Die frühembryonale Mortalität ist die wichtigste Ursache der Trächtigkeitsverluste beim Rind. Mitverantwortlich könnte dafür eine unzureichende Interferon-t (IFN-t) Produktion des Embryos sein, die zu einer Nichterkennung der Trächtigkeit von seiten des Muttertieres führt. Das Ziel dieses Forschungsprojekts ist die Erhöhung der Trächtigkeitsrate durch Transfer von in vitro produzierten Embryonen, die das antiluteolytische Protein INF-t über den Weg des Gentransfers überexprimieren. Dazu werden in einem ersten Schritt verschiedene zu testende DNA-Konstrukte pronuklear bzw. zytoplasmatisch in IVP-Embryonen injiziert und die Expression von INF-t am 7./8. Entwicklungstag mittels RTPCR ermittelt. Die DNA-Konstrukte werden spezifisch für nukleare- und zytoplasmatische Injektion konzipiert. Als Promotoren werden dabei der b-Aktin und der endogene INF-t Promoter verwendet. Die DNA-Konstrukte erhalten ein Reportergen (Neomycin-Resistenz oder Grün-Fluoreszenz-Protein). Für die zytoplasmatische Injektion enthalten die Konstrukte zusätzlich eine murine Amplifikationssequenz. Aus diesen Exerimenten wird ein geeignetes Konstrukt für den spermienvermittelten DNATransfer zur Erzeugung transgener Embryonen ausgewählt. Im zweiten Schritt werden diese transgenen Embryonen gleichzeitig mit den Kontrollembryonen zum Studium ihrer Entwicklungsfähigkeit in 200 Rezipienten transferiert und die Trächtigkeitsraten am Tag 60 analysiert.

死亡的胚胎是皮上最漂亮的毛发。胚胎产生干扰素-t（IFN-t）的方法，是将胚胎移植到胚胎中。这些研究项目是通过体外生产胚胎转移的方法，即抗黄体溶解蛋白INF-1。我们在第一次实验中验证了DNA结构的清晰度。体外受精-胚胎注射中的酶质体及INF-7的表达8. RTPCR检测结果。DNA结构韦尔登专门用于核武器和血浆注射。所有的启动子都由b-Aktin和内源性INF-t启动子组成。Die DNA-Konstrukte erhalten ein Reportergen（Neomycin-Resistenz oder Grün-Resistenz-Protein）.为了酶浆注射能够抑制小鼠扩增序列的结构。这一实验将为精子的DNA转移提供一种新的方法。在200个Rezipienten transferiert和60个Tag analysiert中，Im zweiten Schritt韦尔登将这些转基因胚胎与控制胚胎的研究进行了比较。