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神経系におけるリポキシゲナーゼの局在と生理作用の研究

脂氧合酶在神经系统中的定位和生理效应研究

基本信息

批准号：
60226014
负责人：
山本尚三
金额：
$ 0.83万
依托单位：
The University of Tokushima
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Special Project Research
财政年份：
1985
资助国家：
日本
起止时间：
1985 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

研究目的:リポキシゲナーゼはアラキドン酸に酸素添加する酵素で、それに続く一連の酵素反応でプロスタグランジン・トロンボキサン・ロイコトリエンなどの生理活性物質が生合成される。リポキシゲナーゼが神経系に存在することを示す若干の知見は報告されているが、その局在と生理的役割の詳細は不明である。脳や神経で含量の少ないリポキシゲナーゼの活性を、一般的な酵素活性測定法で定量的に探知することは困難である。そこで、私達が開発しつつあるリポキシゲナーゼに対するモノクローナル抗体を利用した、サンドウィッチ方式の酵素免疫測定法を適用して、動物やヒトの脳や神経におけるリポキシゲナーゼの局在を定量的に検討することを、本研究計画の目的とする。研究成果:今年度はリポキシゲナーゼの一種のシクロオキシゲナーゼについて検討した。酵素に対する抗体を2種類選び、一方のFab断片をペルオキシダーゼで標識し、もう一方の抗体とともに、抗原のシクロオキシゲナーゼと反応させて、免疫沈降物のペルオキシダーゼの活性を測定し、試料中のシクロオキシゲナーゼ量と相関させるような測定系を確立した。この方法では、ウシ精のう腺から精製したシクロオキシゲナーゼを、最低1ngを測定することが可能であった。ウシの各組織のシクロオキシゲナーゼ含量を、この方法でスクリーニングしたところ、今迄にシクロオキシゲナーゼ活性の高いことの知られている精のう腺・血小板・腎髄質の他に、胃・胆のう・消化管各部に高いシクロオキシゲナーゼ含量が認められた。また、下垂体後葉および脳のある部分(新皮質・帯状回・海馬・扁桃体・尾状核・被殻など)に、量は少ないが確実にシクロオキシゲナーゼが存在することが明らかになった。

Objective: To study the synthesis of physiologically active substances in the enzyme reaction system. A number of observations have been made on the existence of a neurologic system, and the details of this system are unknown. It is difficult to determine the amount of protein in the enzyme activity assay. The purpose of this research project is to explore the application of enzyme immunoassay in the detection of antibodies in animals and their brains. Research results: This year, a kind of research on the problem of drug abuse is carried out. 2 kinds of antibodies, one Fab fragment, one antigen, one antibody fragment, one antibody fragment, one antibody, one antibody fragment, one antibody, one fragment, one antibody fragment, one antibody, one antibody, one fragment, one The method is refined, and the minimum is 1ng. The content of protein in various tissues of the plant is determined by the method of enzyme analysis. The activity of protein in various tissues of the plant is high. The content of protein in various parts of the digestive tract is high. The posterior hypophysis and hypophysis (neocortex, hippocampus, tonsil, caudate nucleus, and putamen) are located in the posterior hypophysis and hypophysis.