O^6-メチルグアニン修復不能がん細胞の特性

O^6-甲基鸟嘌呤无法修复的癌细胞特性

• 批准号: 61015046
• 负责人: 池永 満生
• 金额: $ 6.59万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Cancer Research
• 财政年份: 1986
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1986 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-61015046/
• 关键词: 【O^6】-メチルグアニン; メチル転移酵素; ヒト腫瘍細胞; DNA修復; アルキル化剤; DNAトランスフェクション; Me【r^-】

メチルニトロソグアニジン(MNNG)などのアルキル化剤によって作られるDNA損傷のなかで、細胞の致死や突然変異の誘発に主要な役割を演じると考えられている【O^6】-メチルグアニン(【O^6】-MeG)は、メチル転移酵素によって修復される。欧米における研究によれば、樹立されたヒト腫瘍細胞株のなかで、約20%の株は【O^6】-MeGを修復できないMe【r^-】株であると報告されている。本年度はこれらのMe【r^-】細胞に関して、以下のような研究成果を得ることができた。1.大腸菌のメチル転移酵素遺伝子のヒト修復欠損細胞内での発現【O^6】-MeGがヒト細胞にとって真に有害なDNA損傷であることを直接証明するために、大腸菌のメチル転移酵素遺伝子(ada遺伝子)をMe【r^-】のヒト細胞に導入して、アルキル化剤に対する反応を調べた。ada遺伝子とネオマイシン耐性遺伝子の両方を持ったプラスミドDNAを、Me【r^-】のヒト細胞HeLaMRにトランスフェクトして、ネオマイシンとアルキル化剤であるACNUの両方で選抜を行った。得られた形質転換クローン細胞においては、非常に高いメチル転移酵素の活性が見られ、これらの細胞の染色体DNAにはada遺伝子が安定に組み込まれており、mRNAが活発に発現されていた。これらの形質転換クローンは親株のHeLaMR細胞よりも、MNNGに対して数十倍も抵抗性になっていた。また、MNNGによる姉妹染色分体交換も全く生じなかった。以上より、細胞の致死や染色体異常の原因となっているのは、やはり【O^6】-MeGだと考えられる。2.日本人腫瘍細胞株におけるMe【r^-】株の頻度種々の臓器の腫瘍に由来する細胞株40株について、直接メチル転移酵素の活性を調べたところ、このうち5株が酵素活性のないMe【r^-】株であることが分った。

DNA damage, cell death, and mutation induction are the main causes of DNA damage.[O^6]-[O^6]-MeG enzyme repair. About 20% of the cell lines were repaired by O^6-MeG. This year's research results were obtained. 1. Detection of DNA damage in E. coli cells directly demonstrated by the presence of DNA damage in E. coli cells. Detection of DNA damage in E. coli cells. The selection of ACNU is based on the selection of genes, genes, and genes for the development of tolerance genes. The activity of the enzyme in the chromosome DNA of the cell is very high. The activity of the enzyme in the chromosome DNA of the cell is very high. The activity of the enzyme in the chromosome DNA is very high. This is the first time that a person has ever been infected with a virus. All the chromosomes in the chromosome exchange system were produced by MNNG. The above is the cause of chromosome abnormality in cells. 2. Japanese tumor cell lines: 40 cell lines: frequency of tumor cell lines: frequency of tumor cell lines:

项目成果

小野哲也: 臨床科学. 23. 91-95 (1986)

小野哲也：临床科学。23. 91-95 (1986)

池永満生: 実験医学. 4. 206-211 (1986)

池永光男：实验医学。4. 206-211 (1986)

辻村亨 他: 放射線生物研究. 21. 49-62 (1986)

Toru Tsujimura 等人：放射生物学研究 21. 49-62 (1986)

石崎寛治 他: 細胞工学. 5. 557-560 (1986)

Hiroharu Ishizaki 等人：《细胞工程》5. 557-560 (1986)。

Tetsuya Ono, et al.: Biochemical Biophysical Research Communication. 139. 1299-1304 (1986)

Tetsuya Ono 等人：生化生物物理研究通讯。