课题基金 / 基金详情

初代培養肝細胞を用いた肝細胞増殖因子(HGF)の受容体解析

初代培養肝細胞を用いた肝細胞増殖因子(HGF)の受容体解析
使用原代培养的肝细胞进行肝细胞生长因子 (HGF) 受体分析
批准号：
61580171
负责人：
中村 敏一
金额：
$1.22万
依托单位：
The University of Tokushima
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1986
资助国家：
日本
项目状态：
已结题
起止时间：
1986 至 --
来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-61580171/
关键词：
肝細胞増殖因子HGF初代培養肝細胞HGF受容体【^(125)I】化

项目摘要

项目成果

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中文摘要
翻译
ラット血小板からMonoSFPLC,ヘパリンセファロースクロマトグラフィー,【C_4】カラムによる逆相HPLCで純化したHGFはSDS-ポリアクリルアミドゲル電気泳動で分子量85KDに単一バンドを示す。この均一標品を中性条件下で暖和なラクトパーオキシダーゼ法により【^(125)I】化を行った。その結果、HGFは【^(125)I】化されるが、そのHGF活性の大部分が失しなわれ、それとともに初代培養肝細胞あるいは精製肝細胞膜を用いたHGF受容体解析を行ったが、非特異的結合が高く、特異結合を検出することができなかった。これはHGFが69KDと34KDの二種類のサブユニットがジスルフィド結合で構成される大分子量増殖因子であると同時に、熱及び酸処理で容易に失活する不安定なタンパク質に起因する。HGFのように大きな分子できわめて熱に弱い増殖因子を生物活性を失しなわないで【^(125)I】化することは大変困難であると考えられる。したがって、ヨード化の条件をさらに種々検討することにした。さらに暖和なヨード化と考えられるバイオラド社が開発したグルコースオキシダーゼとラクトパーオキシダーゼ不溶化ビーズを用いる方法でHGFをヨード化を行うとHGF活性の保持が比較的良好であった。しかしこの方法でも充分信頼できる程度のHGF受容体への特異結合を得ることができなかった。現在、ボルトン-ハンター法によるヨード化についても試みており、充分特異的にHGF受容体への結合能を持つ【^(125)I】-HGFの調製を工夫している。
英文摘要
ラット血小板からMonoSFPLC,ヘパリンセファロースクロマトグラフィー,【C_4】カラムによる逆相HPLCで純化したHGFはSDS-ポリアクリルアミドゲル電気泳動で分子量85KDに単一バンドを示す。この均一標品を中性条件下で暖和なラクトパーオキシダーゼ法により【^(125)I】化を行った。その結果、HGFは【^(125)I】化されるが、そのHGF活性の大部分が失しなわれ、それとともに初代培養肝細胞あるいは精製肝細胞膜を用いたHGF受容体解析を行ったが、非特異的結合が高く、特異結合を検出することができなかった。これはHGFが69KDと34KDの二種類のサブユニットがジスルフィド結合で構成される大分子量増殖因子であると同時に、熱及び酸処理で容易に失活する不安定なタンパク質に起因する。HGFのように大きな分子できわめて熱に弱い増殖因子を生物活性を失しなわないで【^(125)I】化することは大変困難であると考えられる。したがって、ヨード化の条件をさらに種々検討することにした。さらに暖和なヨード化と考えられるバイオラド社が開発したグルコースオキシダーゼとラクトパーオキシダーゼ不溶化ビーズを用いる方法でHGFをヨード化を行うとHGF活性の保持が比較的良好であった。しかしこの方法でも充分信頼できる程度のHGF受容体への特異結合を得ることができなかった。現在、ボルトン-ハンター法によるヨード化についても試みており、充分特異的にHGF受容体への結合能を持つ【^(125)I】-HGFの調製を工夫している。
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会议论文
がん-間質相互作用のメディエーターとしてのHGF-Met糸の意義とその制御
  • 批准号：
    18013031
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
  • 资助金额：
    $8.58万
  • 财政年份：
    2006
  • 负责人：
    中村 敏一
  • 依托单位：
    Osaka University
がん-間質相互作用のメディエーターとしてのHGF-Met系の意義とその制御
  • 批准号：
    17014060
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
  • 资助金额：
    $5.12万
  • 财政年份：
    2005
  • 负责人：
    中村 敏一
  • 依托单位：
    Osaka University
上皮・間葉相互作用によるがん悪性化の分子機構とその制御
  • 批准号：
    12215082
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
  • 资助金额：
    $65.28万
  • 财政年份：
    2000
  • 负责人：
    中村 敏一
  • 依托单位：
    Osaka University
HGF(肝細胞増殖因子)遺伝子治療を用いた難治性臓器疾患の治療研究
  • 批准号：
    98F00479
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for JSPS Fellows
  • 资助金额：
    $1.34万
  • 财政年份：
    1999
  • 负责人：
    中村 敏一
  • 依托单位：
    Osaka University
国内基金
海外基金
米糠活性七肽介导HGF调控脂滴自噬改善骨关节炎的机制研究
  • 批准号：
    2025JJ50521
  • 项目类别：
    省市级项目
  • 资助金额：
    --
  • 批准年份：
    2025
  • 负责人：
    邝磊
  • 依托单位：
    中南大学湘雅二医院
复方香巴戟膏介导的NO/HGF/c-met通路活化卫星细胞促进损伤后肌肉组织再生
  • 批准号：
    2025JJ70694
  • 项目类别：
    省市级项目
  • 资助金额：
    --
  • 批准年份：
    2025
  • 负责人：
    丁轩
  • 依托单位：
    常德市第一中医医院
安罗替尼通过调控HGF/c-MET信号通路与自噬相互作用促进人脑胶质瘤细胞凋亡的机制研究
  • 批准号：
  • 项目类别：
    省市级项目
  • 资助金额：
    --
  • 批准年份：
    2025
  • 负责人：
    刘细帮
  • 依托单位：
MSC-EVs来源circKCMF1通过调控巨噬细 胞Akt-FOXO3a-HGF轴促进老年肝脏再生 的作用机制研究
  • 批准号：
  • 项目类别：
    省市级项目
  • 资助金额：
    10.0万元
  • 批准年份：
    2025
  • 负责人：
    张杰滨
  • 依托单位：
    中山大学