大腸菌染色体複製の開始機構

大肠杆菌染色体复制的启动机制

• 批准号: 62580208
• 负责人: 小川 徹
• 金额: $ 0.96万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1987
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1987 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-62580208/
• 关键词: DNA複製; oriC; DnaA蛋白; HU蛋白; RNAポリメラーゼ

染色体DNAの複製は起点における開始反応のレベルで制御されている. 大腸菌では複製起点(oriC)を持つプラスミドの複製反応を精製酵素を用いて再構成することが可能になりつつある. oriCでの複製蛋白複合体の形成に先がけて開始蛋白DnaAの他にRNAポリトラーゼとHU蛋白がoriCDNAに作用することが示唆されているが, その機能は不明である. これら2種類の蛋白の複製開始における機能を知る目的で以下の研究を行なった. 1.転写産物の解析:oriCDNAを鋳型に用いてRNAポリメラーゼによる転写反応を行ない, 転写物の解析を行なった. oriCに右接する16KD蛋白遺伝子の転写が複製制御に関与する事が知られているが, この転写はDnaAにより抑制される事が判明した. RNAポリメラーゼとDnaAのバランスが転写抑制の程度に影響を及ぼすが, 実際に複製開始反応が起きる条件で転写制御が起さる事が示唆された. 次にoriC近傍での他の転写物を探索した所, oriC内177番目の塩基からunc遺伝子方向に転写が起きる事が判明した. この転写物は蛋白をコードしておらず, DnaAおよびHU蛋白により転写が抑制される. 16KD遺伝子の転写は複製開始に必須でない事が判明しており, 今回新たに見出されたoriC内で開始する転写が複製開始に直接関与している可能性が考えられる.2.HU蛋白欠損株におけるDNA複製:今本(理研)らによって分離されたHU蛋白欠損株におけるDNA複製の様式を解析した. この株はHU蛋白を完全に欠失しているが生育可能で, oriCから複製開始することが判明した. 核様体の構造異常が見られ, また核様体の分配機構, 細胞分裂機構の異常が観察された. 粗酵素画分での解析から, 他の核様体蛋白が複製開始反応に際してHU蛋白の代りを務めている可能性が示唆された.

Chromosomal DNA replication starts at the beginning of the system, which is responsible for the control of chromosome replication. The starting point for replication (oriC) of the fungus is to copy the reverse enzyme and then use the enzyme to prepare the enzyme. The oriC replication protein complex forms a precursory protein, DnaA protein, RNA protein, HU protein, oriCDNA protein, instigated protein, and the mechanism is not known. At the beginning of protein replication, we will be able to understand the purpose of the following research. 1. "write" to parse: oriCDNA "write" to parse "RNA" and "write" to parse "line". OriC right-click on 16KD protein to make a copy of the system, and then write a copy of the control system and write it on the right, then write the DnaA message on the right, the inhibition on the other hand. RNA has a significant impact on the extent of write suppression in DnaA, and the international system has begun to respond to the impact of writing conditions. The second oriC is close to him, writing, exploring, writing, writing, DnaA, protein, HU, protein, protein. It is necessary for 16KD to start a copy. This time, you can start a copy in oriC. The possibility of starting a copy directly and directly. 2.2.HU protein deficient strain copy DNA copy: in this case, we need to isolate the HU protein deficiency strain. DNA copy copy analysis. The HU protein of this strain was completely lost. It was possible for the baby to reproduce. The replication of the oriC gene was performed. It is common to see that the nuclear body is used to make nuclear cells, and that the nuclear body distribution organs and the cell division organs are often used to monitor the nuclear body. Crude enzyme analysis analysis, he said that the nucleosomal protein replication began to reflect the possibility of HU protein production.