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大腸菌oric領域を含む複合体の構造, 形成周期性および染色体複製開始との関連性

含有大肠杆菌 oric 区域的复合物的结构、形成的周期性以及与染色体复制起始的关系

基本信息

批准号：
62615505
负责人：
永井和夫
金额：
$ 1.02万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1987
资助国家：
日本
起止时间：
1987 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

E.col:K12PC2(dncac)株の染色体複製開始を温度シフトにより同調化し経時的にサンプリング後, 複製開始領域(oric領域)を含む複合体(oric複合体)の沈降する細胞画分中のDNAをoric, terc, lac領域を含むプラスミドをプローブとするハイブリダイゼーションによって解析した. その結果, (1)非許容温度(42°C)から許容温度(30°C)にシフトすると, 最初および2回目の複製開始時に顕著なoric複合体の形成のピークがみられた. (2)42℃から30°Cにシフトして染色体複製を開始させ, 10分後に再び42°Cにシフトすることにより2回目以降の複製開始を仰制したところ, 30°Cにシフト後複製が開始する時点でoric複合体は急激に増加し, 複製の進行に平行して減少する. その後再び複合体の形成があり, 更に培養時間が経過すると消失した. 30°Cにシフト時にterc領域もterc領域foric複合体の回収される分画中に有意に存在し, その後減少するが, 複製の完了後に対応する時点でoric複合体の形成されるよりやや早くにピークを形成する. lacオペロン領域DNAは全期間を通じこの画分に回収されなかった. (3)上記(2)の条件付下42°Cでoric複合体が形成している菌体を30°Cに戻すと直ちに複製を開始した. (4)42°Cから30°Cにシフトする10分前にナリジキン酸を添加してDNA合成の全くみられない状態でもoric複合体は正常に形成されたが, terc複合体の形成は認められなかった. また, ナリジキン酸を複製開始後20分目に加え, DNA鎖の伸長を止めた条件でも, oric複合体の形成のみが観察された. 以上より, oric複合体は染色体複製開始を可能ならしめるものと考えられる. また, oric複合体の形成がDNA複製の有無とは独立して同期的かつ一過性にみとめられたことから, 大腸菌は染色体複製とは別の生物時計を備えており, その時計により複製開始が制御されていると思われる.

E.col: K12PC2 (dncac) strain chromosome replication start temperature, homology, time, replication start domain (oric domain), oric-containing complex (oric complex), sedimentation, DNA ORIC, TERC, LAC domain, including DNA ORIC, TERC, LAC domain. The results are as follows: (1) When the temperature of non-allowable volume (42°C) changes from allowable volume (30°C) to allowable volume (30°C), the formation of oric-complex is observed at the beginning of replication. (2)42 At 30°C, chromosome replication begins, 10 minutes later, at 42°C, and 2 minutes later, replication begins, and replication begins. At 30°C, replication begins, and the oric complex increases rapidly, and replication proceeds in parallel. The formation and disappearance of the complex after incubation. 30°C when terc domain terc domain foric complex is formed after replication is completed. Lac domain DNA full time, full time. (3)Under the conditions described in (2) above, an oric complex is formed at 42°C, and the cell is replicated at 30°C. (4)42 The temperature of 30°C was 10 minutes before the addition of acid to DNA synthesis. The formation of terc complex was normal. 20 minutes after the start of DNA replication, the elongation of DNA locks was stopped. Above, the oric complex may begin to replicate chromosomes. The formation of an oric complex is dependent on the presence or absence of DNA replication, and the timing of chromosome replication in Escherichia coli is dependent on the timing of replication.