大腸菌染色体複製開始における転写およびDnaA蛋白の機能

DnaA 蛋白在大肠杆菌染色体复制起始中的转录和功能

• 批准号: 04256213
• 负责人: 小川 徹
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1992
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1992 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-04256213/
• 关键词: DNA複製; oriC; DnaA

大腸菌染色体の複製開始にはRNAポリラーゼによる転写反応が関与していることを古くから示唆されているが、その実体および機能については不明な点が多い。oriCプラスミドを用いたin vivoの研究から、我々はoriCの左側にあるgid遺伝子のプロモーターからの左向きの転写が複製開始に重要な役割を担っており、oriCの右側にあるmioC遺伝子のプロモーターからの左向きの転写も補助的に開始反応に関与していることを明らかにしてきた。これらの両プロモーターを欠失させた場合は人為的に挿入したプロモーターに依存して複製可能であるが、このプロモーターは本来のgidやmioCプロモーターと同様に左向きの場合が複製活性化能が高く、oriCの左側からoriC内に向かう複製は活性化能を示さない。これらの結果からRNAポリメラーゼの後方にできる負のスーパーコイルがDnaA蛋白によるopen comples形成反応を促進する可能性が考えられる。一方、染色体上のgidおよびmioCプロモーターからの転写を欠失させても見かけ上細胞の増殖はあまり影響を受けず、この場合には他の転写が活性化に関与している可能性も考えられる。温度感受性のdnaC変異株を用いてDNA合成を同調化させてgidおよびmioCの転写産物を定量したところ、前者は複製開始直後に顕著な阻害を受けるのに対して後者は複製開始直前に顕著な阻害を受けることが判明した。DnaA変異株を用いた解析からこの阻害はmioC遺伝子のプロモーター上流のDnaA boxへのDnaA蛋白の周期的結合によることが示唆された。DnaA蛋白の細胞内濃度は細胞周期を通して一定であると考えられているが、DNA上の特定の部位においてはかなり変化しているものと思われる。

Coliform chromosome の duplicate に は RNA ポ リ ラ ー ゼ に よ る planning to write an 応 が masato and し て い る こ と を ancient く か ら in stopping さ れ て い る が, そ の be body お よ び function に つ い て は が い more unknown な point. oriCプラス ドを ドを use プラス たin Vivo の research か ら, I 々 は oriC の left に あ る gid heritage 伝 son の プ ロ モ ー タ ー か ら の left to き の planning write が duplicate に cut を bear important な service っ て お り, oriC の right に あ る mioC heritage 伝 son の プ ロ モ ー タ ー か ら の left to き の planning write も subsidies に start against 応 に masato and し て い る こ と を Ming ら か に し Youdaoplaceholder0 た た. こ れ ら の struck プ ロ モ ー タ ー を owe lost さ せ た occasions は man-made に scions into し た プ ロ モ ー タ ー に dependent し て replication may で あ る が, こ の プ ロ モ ー タ ー は originally の gid や mioC プ ロ モ ー タ ー と with others に left to き の occasions が replication activity can が high く, oriC の left か ら oriC に inside to か う can copy は activeness Youdaoplaceholder0 indicates さな さな. こ れ ら の results か ら RNA ポ リ メ ラ ー ゼ の rear に で き る negative の ス ー パ ー コ イ ル が DnaA protein に よ る open comples formed the 応 を promote す る possibility が exam え ら れ る. Side, chromosome の gid お よ び mioC プ ロ モ ー タ ー か ら の planning write を owe lost さ せ て も see か け の raised on cell colonization は あ ま り を by け ず, こ の occasions に は he の planning write が activeness に masato and し て い る possibility も exam え ら れ る. Temperature sensitivity の dnaC - different strains を with い て DNA synthesis を homology is changed さ せ て gid お よ び mioC の product planning write を quantitative し た と こ ろ, the former は duplicate start straight after に 顕 the な resistance against を by け る の に し seaborne て latter は duplicate ahead に 顕 the な resistance against を by け る こ と が.at し た. DnaA - different strains を with い た parsing か ら こ の resistance against は mioC posthumous son 伝 の プ ロ モ ー タ ー upper の DnaA box へ の DnaA protein の cycle combined に よ る こ と が in stopping さ れ た. DnaA protein の は intracellular concentration cell cycle を tong し て certain で あ る と exam え ら れ て い る が, DNA の specific part の に お い て は か な り variations change し て い る も の と think わ れ る.